【摘 要】
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目的：探讨大黄素对肠道胆汁酸代谢相关蛋白表达的影响.方法：(1)应用α-异萘硫氰酸酯(ANIT)对大鼠灌胃来建立急性肝内胆汁淤积模型.取32只SD大鼠分为正常组、大黄素组、大鼠模型组和模型十大黄素组.(2)造模后48小时静脉采血,检测各组实验动物的肝功能生化指标ALT、AST、DBIL、TBIL、TBA和ALP的变化.处死动物后收集肝脏和回肠标本,观察其组织病理学改变.(3)应用实时荧光定量PCR
【机 构】
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重庆医科大学附属儿童医院 400014
【出 处】
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中华医学会第十八次全国儿科学术会议
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目的：探讨大黄素对肠道胆汁酸代谢相关蛋白表达的影响.方法：(1)应用α-异萘硫氰酸酯(ANIT)对大鼠灌胃来建立急性肝内胆汁淤积模型.取32只SD大鼠分为正常组、大黄素组、大鼠模型组和模型十大黄素组.(2)造模后48小时静脉采血,检测各组实验动物的肝功能生化指标ALT、AST、DBIL、TBIL、TBA和ALP的变化.处死动物后收集肝脏和回肠标本,观察其组织病理学改变.(3)应用实时荧光定量PCR检测回肠末端钠依赖性转运蛋白(ASBT)、回肠胆汁酸结合蛋白(IBABP)、有机阴离子转运蛋白(OSTc/β)、家族聚集性肝内胆汁淤积基因1(FIC1)、核受体法尼酯衍生物X受体(FXR)、多药耐药相关蛋白2(MRP2)和多药耐药相关蛋白3 (MRP3)mRNA水平的表达.Western blot方法检测上述指标的蛋白表达.结果：(1)模型组与正常组比较,ALT、AST、DBIL、TBIL、TBA和ALP浓度均有不同程度的增高(P＜0.01);光学显微镜下示:肝组织中门管区大量中性粒细胞浸润,肝细胞有变形坏死;回肠粘膜绒毛完整性被破坏,部分稀疏变短、脱落坏死,上皮细胞排列紊乱.在mRNA和蛋白水平ASBT、IBABP、OST和FXR表达降低(P＜0.01或P＜0.05),FIC1表达增高(P＜0.01),MRP2 mRNA、MRP3 mRNA和蛋白表达无显著差异(P＞0.05),MRP2蛋白表达下降(P＜0.05).(2)模型+大黄素组与模型组比较,ALT、AST、DBIL、TBIL、TBA和ALP均降低(P＜0.05),肝脏组织病理学改变减轻,回肠粘膜绒毛明显恢复.ASBT、IBABP、OST、FXR和MRP2 mRNA和蛋白水平表达低于模型组(P＜0.01或P＜0.05),FIC1表达继续增高(P＜0.01),MRP2 mRNA、MRP3 mRNA和蛋白表达无显著差异(P＞0.05),MRP2蛋白表达下降(P＜0.05)(3)大黄素组与正常组比较上述指标无显著性改变(P＞0.05).结论：(1)大黄素能明显降低血清中ALT、AST、DBIL、TBIL、TBA和ALP的浓度,减轻肝损伤.(2)急性肝内胆汁淤积可损伤回肠粘膜屏障.(3)大黄素通过下调肠道中与胆汁酸代谢相关的转运蛋白ASBT、IBABP、OST、FXR和MRP2和上调FIC1的表达以减少胆汁酸的重吸收并增加其排泄,成为其降低胆汁酸、保护肝脏的分子作用机制.
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