【摘 要】
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目的：探讨人类心肌匀浆上清液对骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)诱导分化的影响及相关基因的时序表达。方法：体外分离培养人类MSCs，传至第四代加入自体心肌匀浆上清液，持续作用两周，相差显微镜下观察MSCs形态变化，免疫荧光方法鉴定心肌特征性肌动蛋白α(α-actin)和肌钙蛋白(cTnT)的表达，应用半定量RT-PCR技术分析Nkx-2.5、GATA-4、M
【机 构】
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南昌大学第一附属医院,心血管内科 泌尿外科研究所，江西 330006
【出 处】
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第一届全国中西医结合心血管病中青年医师论坛
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目的：探讨人类心肌匀浆上清液对骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSCs)诱导分化的影响及相关基因的时序表达。
方法：体外分离培养人类MSCs，传至第四代加入自体心肌匀浆上清液，持续作用两周，相差显微镜下观察MSCs形态变化，免疫荧光方法鉴定心肌特征性肌动蛋白α(α-actin)和肌钙蛋白(cTnT)的表达，应用半定量RT-PCR技术分析Nkx-2.5、GATA-4、MEF-2C、α-MHC、cTnT等相关基因在分化过程中的动态时序表达。
结果：经心肌匀浆上清液诱导后，MSCs体积变大，立体感增强，形态近似棒状。诱导两周时α-actin及cTnT阳性细胞比例分别为25.53％和23.48％。Nkx-2.5、GATA-4、MEF-2C基因在诱导后三天表达开始增强，其中GATA-4、MEF-2C诱导后五天达高峰，以后维持在较高水平，Nkx-2.5则随诱导时间逐渐增强；α-MHC、cTnT基因诱导前无表达，于诱导第三天出现表达，以后维持在高水平。
结论：心肌匀浆上清液对MSCs具有定向诱导作用，在此过程中，伴随着Nkx-2.5、GATA-4、MEF-2C、α-MHC和cTnT基因的时序表达变化。
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