【摘 要】
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目的 从三邻甲苯磷酸酯(TOCP)暴露鸡的脊髓组织中筛选迟发性神经毒性(OPIDN)相关基因,为探讨OPIDN的发病机制提供靶基因信息谱.方法 利用苯甲基磺酰氟(PMSF)在有机磷化合物(OP)暴露之前给予能防止OPIDN发生,但对OP的急性毒性却无影响的这一作用特点,在OP暴露之前进行PMSF干预,通过OP和PMSF的联合应用,筛选OPIDN相关差异表达基因.成年母鸡12只,随机分为TOCP暴露
【机 构】
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大连医科大学劳动卫生与环境卫生学教研室,辽宁大连116044
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目的 从三邻甲苯磷酸酯(TOCP)暴露鸡的脊髓组织中筛选迟发性神经毒性(OPIDN)相关基因,为探讨OPIDN的发病机制提供靶基因信息谱.方法 利用苯甲基磺酰氟(PMSF)在有机磷化合物(OP)暴露之前给予能防止OPIDN发生,但对OP的急性毒性却无影响的这一作用特点,在OP暴露之前进行PMSF干预,通过OP和PMSF的联合应用,筛选OPIDN相关差异表达基因.成年母鸡12只,随机分为TOCP暴露组(1000 mg·kg-1,一次灌胃给予)、先给PMSF后再暴露TOCP的PMSF干预组(皮下注射PMSF 40 mg· kg-124 h后再一次性灌胃TOCP 1000 mg· kg-1)和生理盐水对照组.染毒第5天处死鸡,低温下分离脊髓腰段制成匀浆,并依次进行总RNA提取、纯化、体外转录合成cRNA探针、生物素标记、Chicken Genome 430 2.0 array基因芯片杂交、扫描杂交信号、最后进行芯片数据处理和生物信息学分析.以差异倍数大于2或小于-2有统计学意义(P＜0.05).结果 基因芯片结果显示,与对照组相比,TOCP组有748个基因差异表达,根据PMSF的特点,在这些差异表达基因中选择与PMSF干预组比较无显著差异的基因520个,包括上调基因205个和下调基因315个；其中差异表达在3倍以上基因有36个,上调基因13个和下调基因23个；主要包括神经递质传递、细胞骨架、细胞凋亡等相关功能蛋白基因.结论 TOCP暴露鸡脊髓基因表达谱中有520个基因与OPIDN相关,其中有36个基因与OPIDN关系比较密切,值得进一步探讨其与OPIDN发病机制的关系.
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