VEGF动员内源性EPCs促进MCAO/R小鼠神经功能修复

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目的:观察局灶性脑缺血再灌注模型(MCAO/R)小鼠外周循环中血管内皮祖细胞(EPCs)的数量变化,并应用血管内皮生长因子(VEGF)动员小鼠自体骨髓中的EPCs,增加EPCs在外周循环的表达,观察脑梗死小鼠的神经结构与功能恢复情况,达到治疗脑梗死的目的。方法:将实验小鼠完全随机分成3组(n=12)①假手术组:暴露同侧颈动脉,不栓塞;②MCAO/R组:小鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型组;③MCAO/R+VEGF组:小鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后,给予生理盐水稀释的VEGF腹腔内注射,动员体内的EPCs(每日1次,持续1周),在动员过程中的第1、4、7天进行神经功能评分,然后从内眦静脉采血,使用流式细胞仪检测MCAO/R组及MCAO/R+VEGF组小鼠外周循环中EPCs的数量;并将小鼠断头取脑,并对脑组织TTC染色后计算并比较小鼠脑梗死体积的变化。结果:假手术组流式细胞计检测外周循环中的CD34~+阳性率为0.199%,MCAO/R组在手术后第1d、4d、7d流式细胞计检测外周循环中的CD34~+阳性率分别为1.953%、0.814%、0.331%,MCAO/R+VEGF组小鼠在动员后第1d、4d、7d流式细胞计检测外周循环中的CD34~+阳性率分别为3.127%、4.813%、2.914%;MCAO/R+VEGF组在动员过程中,在给药第1d小鼠外周循环中的EPCs就表现显著增加趋势,在给药第4dEPCs的数量达到高峰,其增加趋势持续到第7d;并且在这三个时间点上,MCAO/R+VEGF组外周循环中EPCs的数量与其它两组比较均具有统计学意义(p<0.01)。神经功能评分:MCAO/R组小鼠在术后的第7天评分较术后第4天低(p<0.05);MCAO/R+VEGF组在动员的1周内神经功能缺失体征逐渐减轻、神经功能评分有明显下降趋势,且该组在给药第4d及第7d的神经功能评分值较同时间点的MCAO/R组降低(p<0.05)。脑梗死体积:MCAO/R+VEGF组小鼠在给药第4天较第1天,第7天较第4天梗死灶体积明显缩小(p<0.01),且MCAO/R+VEGF组在给药第4天及第7天的梗死灶体积较同时间点的MCAO/R组有显著降低(p<0.01)。结论:应用VEGF能显著动员MCAO/R模型小鼠骨髓中的EPCs,使外周循环中EPCs的数量增加,从而增强脑组织缺血区的血管新生、改善脑缺血局部的血流灌注,促进了小鼠缺血性半暗带的恢复,缩小了梗死灶的体积,促进了神经功能恢复,达到治疗脑梗死的目的,为缺血性脑血管病的临床治疗提供新的思路。
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