成软骨诱导脂肪干细胞复合人脐带wharton胶支架修复膝关节软骨缺损的远期效果观察

来源 :中华医学会第十八届骨科学术会议暨第十一届COA国际学术大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:aidam
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  目的:评价成软骨方向诱导后的脂肪干细胞复合人脐带wharton胶支架修复膝关节软骨缺损远期效果。方法:从新西兰大白兔皮下脂肪分离脂肪干细胞,流式细胞鉴定其干细胞特性后培养至P3代,加入诱导液(DMEM中加入10%FBS,10ng/ml TGF-β1,25ng/ml bFGF,10-7M地塞米松)成软骨方向二维诱导两周,将终浓度为10×105/ml诱导后细胞与wharton胶支架复合继续三维诱导一周构建组织工程软骨,扫描电镜观察细胞在支架上分布及黏附情况;甲苯胺蓝、番红"O"、二型胶原免疫组化染色观察细胞外基质分泌情况;FDA-PI染色后激光共聚焦显微镜及Hoechst33258染色评估细胞在支架上的活力及增殖情况。
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