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发酵法生物制氢主要分为光发酵法和暗发酵法。暗发酵产氢细菌主要有梭菌属(Clostridium)、肠杆菌属(Enterobacter)和近年来新发现的产乙醇杆菌属(Ethanoligenes)等。氢化酶作为产氢细菌末端释氢关键酶,在微生物能量和氢代谢中起到了重要的作用。哈尔滨产乙醇杆菌YUAN-3(Ethanoligenens harbinense YuAN-3)是从乙醇型产氢反应器中分离出的一株高效产氢细菌,具有乙醇发酵代谢。菌株YUAN-3在pH 4.5左右时具有产氢效能,而在此pH条件丁酸发酵细菌已经丧失活性。因而,克隆其氢化酶,并实现体外表达对了解YUAN-3特殊的发酵类型和低pH值条件下高释氢能力将有理论和实际意义。