目的：β-葡萄糖苷酶是一类可从糖苷和寡糖的非还原端水解β-1,4糖苷键从而释放糖苷配基的酶,在工业生物技术领域有重要应用价值,但其产物葡萄糖的反馈抑制效应限制了其实际应用效能。因此,阐明产物葡萄糖对β-葡萄糖苷酶的影响机制对通过酶工程技术提升酶的应用潜能至关重要。方法：在本工作中,我们利用定点突变、分子对接、生化和结构性质分析等手段,对两个序列相似但葡萄糖依赖性迥异的GH1家族β-葡萄糖苷酶进行研究,以揭示该家族酶耐受葡萄糖抑制或耐受葡萄糖甚至受其促活的机制。结果：结果表明,葡萄糖在除可与底物通道底部的活性位点结合外,还可与通道中部和外部的位点结合,且与不同位点结合的倾向性不同,而这些位点结合倾向性之间的相对大小决定了葡萄糖对酶活性的影响。结论：据此,我们提出了一个可解释葡萄糖对GH1家族β-葡萄糖苷酶活性影响的通用机制。该机制除可用于指导GH1家族β-葡萄糖苷酶的理性改造,也可为理解其它酶的相关性质,尤其是酶催化活性受底物影响的机制提供了参考。本研究受国家"863"计划项目课题经费资助(2014AA093515)。