【摘 要】
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目的：本实验利用激光扫描共聚焦显微镜(Laser scanning confocal microscope,LSCM)观察受一定强度的电磁脉冲(Electromagnetic Pulse,EMP)辐照后,小鼠睾丸支持细胞内波形蛋白的变化,明确波形蛋白在EMP辐照致血睾屏障(Blood-testis Barrier,BTB)通透性改变过程中的作用.方法：将受辐照小鼠装在有机玻璃小盒,小盒由10个单独
【机 构】
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第四军医大学预防医学院放射医学教研室,陕西 西安 710032
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目的：本实验利用激光扫描共聚焦显微镜(Laser scanning confocal microscope,LSCM)观察受一定强度的电磁脉冲(Electromagnetic Pulse,EMP)辐照后,小鼠睾丸支持细胞内波形蛋白的变化,明确波形蛋白在EMP辐照致血睾屏障(Blood-testis Barrier,BTB)通透性改变过程中的作用.方法：将受辐照小鼠装在有机玻璃小盒,小盒由10个单独的小舱组成,每个小舱可放一只固定体位的小鼠,小舱四面有通气孔,以保证小鼠正常呼吸.将辐照组细胞放在EMP发生器辐射场中,进行场强200 kV·m-1,200次脉冲的电磁脉冲辐照,对照组进行假照射.取小鼠双侧睾丸,将组织消化后原代培养睾丸支持细胞,培养至8天固定细胞.完成细胞鉴定后,进行睾丸支持细胞波形蛋白及细胞核的双标荧光染色,在激光共聚焦显微镜下观察.结果：(1)原代培养小鼠睾丸支持细胞的鉴定：经HE染色、Feulgen染色、Fas-L免疫组织化学染色,结果表明原代培养的细胞是睾丸支持细胞；(2) EMP辐照对支持细胞内波形蛋白的影响：正常对照组的小鼠睾丸支持细胞的波形蛋白形态、走向一致；受200 kV.m-1、200次脉冲的EMP辐照后不同时间点,小鼠睾丸支持细胞的波形蛋白的走向发生了一定程度的变化.与正常对照组相比较,波形蛋白的走向在EMP辐照后1h、2h、6h均显示出一定的紊乱,不如正常对照组的一致、规律.辐照组各组间无显著差异.结论：本实验结果表明,一定强度的电磁脉冲辐射能够影响睾丸支持细胞内波形蛋白的走向,可能是电磁辐射导致BTB通透性改变的原因之一.电磁脉冲辐照后波形蛋白与TJ相关蛋白间的相互关联,以及电磁辐射引起波形蛋白、TJ相关蛋白的调控机制,有待于进一步探讨.
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