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目的 应用间歇性低氧诱导apoE-/-小鼠氧化应激,结合高脂饮食制作动脉粥样硬化模型,观察红景天对小鼠体重、血脂及主动脉斑块形成的影响.从而探讨红景天在动脉粥样硬化防治中的作用及其可能的机制.方法 1、动物造模：8周龄雄性apoE-/-小鼠在高脂饮食的喂养条件下,置于低氧饲养箱内以每日12小时间歇性低氧(10％O2)刺激12周,制作小鼠低氧诱导氧化应激致动脉粥样硬化模型.2、分组及给药方法：将小鼠随机分为低氧和正常氧两大组,两大组内再分为6个小组,每小组各6只,分别为(1)正常饮食组(normal diet组,ND)；(2)高脂饮食组(high fat diet组,HFD)；(3)高脂饮食+低剂量红景天组(low dose Rhodiola组,Rd-L,2.5g/kg.d)；(4)高脂饮食+中剂量红景天组(Moderate dose Rhodiola组,Rd-M,5g/kg.d)；(5)高脂饮食+高剂量红景天组(High dose Rhodiola组,Rd-H,10g/kg.d)；(6)高脂饮食+阳性药物对照维生素E组(VitE组,VE,1g/kg.d).各干预组小鼠每日上午给予不同剂量药物灌胃一次,对照组小鼠用等量蒸馏水灌胃,连续12周.3、标本收集和指标检测：实验第12周末,采集小鼠血清及主动脉标本检测如下指标：(1) ELISA检测血清氧化型低密度脂蛋白(oxLDL)；(2)油红0及HE染色观察主动脉斑块分布、大小及组织病理变化；(3)免疫组化检测主动脉内皮细胞及斑块内NF-κB的表达；(4) DHE阴离子荧光探针检测主动脉原位超氧阴离子(ROS)水平；(5)分光光度法检测主动脉组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)活性和脂质过氧化产物丙二醛(MDA)含量.(6)实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹法检测小鼠主动脉中HIF-1α和VEGF mRNA表达及蛋白含量.结果 1、一般情况和动物模型的大体观察实验过程中共死亡小鼠4只.实验结束时每组动物数目大于5只.12周后小鼠主动脉血管内壁可见黄色纵向走行脂质条纹和连接呈片状粥样斑块,集中在弓部和腹主动脉.低氧条件下,斑块面积及厚度加重.各组小鼠间体重无明显差异(P＞0.05).2、血清LDL水平12周高脂饮食后apoE-/-小鼠血清LDL水平显著增高,与普通饮食组比较,有显著统计学差异,而红景天不影响血清LDL水平,干预组间比较(P＞0.05).3、主动脉整体油红O染色低氧组斑块面积明显高于常氧组.低氧条件下,维生素E及各剂量红景天组斑块面积,较高脂饮食组明显减小(P均＜0.05)；其中以高剂量组最为显著,与维生素E组比较,有显著统计学差异.而常氧各剂量红景天组斑块面积与高脂饮食组相比,无明显改变(P＜0.05).4、DHE染色低氧组主动脉原位的DHE荧光强度较常氧组显著增加.低氧各剂量红景天组DHE荧光强度较高脂饮食组均显著降低(P＜0.01)；其中以高剂量红景天组降低最为显著.而常氧各剂量红景天组DHE荧光强度与高脂饮食组比较,无明显统计学差异(P＞0.05).5、氧化及抗氧化指标低氧组主动脉中MDA的含量较常氧组显著增加.低氧各剂量红景天组MDA含量均显著低于高脂饮食组,差异有统计学意义(P＜0.05).而常氧各剂红景天组MDA的含量,与高脂饮食组相比,无明显统计学差异(P＞0.05).低氧组主动脉中SOD的活性较常氧组显著降低.低氧中、高剂量红景天组SOD活性显著增高,与高脂饮食组比较,差异有显著统计学意义(P＜0.01),其中高剂量组SOD的活性,与维生素E组比较,无统计学差异(P＞0.05).6、血清oxLDL含量低氧高脂饮食后小鼠血清oxLDL含量明显增高.低氧低、中、高剂量红景天组oxLDL含量均显著低于高脂饮食组P＜0.01；其中以高剂量红景天组降低最为显著.常氧各剂量红景天组oxLDL含量,与高脂饮食组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).7、免疫组化低氧普通饮食组小鼠主动脉组织切片中NF-κB p65阳性细胞数明显高于常氧普通饮食组,低氧结合高脂饮食后核染色阳性数量增加更为显著.常氧高剂量红景天组及低氧中、高剂量红景天组NF-κB p65表达降低,与对应高脂饮食组相比,光密度相对值有显著差异(P＜0.05)；其中以低氧高剂量红景天组效果最为明显,斑块内仅有少量核表达阳性细胞,与常氧高剂量组比较,有统计学差异(低氧Rd-H：8.67±3.48 vs.常氧Rd-H：39.67±5.45,P＜0.05).8、实时荧光定量PCR两大组内各干预小组(包括高脂饮食和红景天干预组)HIF-1α及VEGF mRNA表达,与普通饮食对照组比较,均无统计学差异(P＞0.05).9、Western blot检测与普通饮食组比较,低氧或高脂饮食均能诱导小鼠主动脉内HIF-1α及VEGF蛋白量增高P＜0.05.常氧各剂量红景天组HIF-1c及VEGF蛋白量与普通饮食组比较,无统计学差异(P＞0.05)低氧各红景天组的HIF-1c及VEGF蛋白表达均较普通饮食组显著增高,并且与高脂饮食组比较,也有显著统计学差异(P＜0.01).维生素E组HIF-1α及VEGF蛋白量与普通饮食组比较,无统计学差异(P＞0.05).结论 1、间歇性低氧诱导了apoE-/-小鼠体内氧化应激水平的增高,致使主动脉内ROS水平增加,脂质过氧化加剧,NFκB p65表达增强,导致了动脉粥样硬化斑块的形成.低氧结合高脂饮食后使氧化应激的水平和动脉粥样硬化斑块的形成更为加重.2、低氧和高脂饮食均能促进apoE-/-小鼠主动脉HIF-1α蛋白含量增加.3、红景天可显著增加小鼠的体重,改善一般状况,但对血脂无明显作用.4、只有在低氧的情况下,红景天才能有效抑制主动脉内ROS过度生成,减轻脂质过氧化,降低斑块中NF-κB p65聚集,最终抑制动脉斑块形成.5、红景天在低氧条件下,显著增高了主动脉内HIF-Ⅰα及下游VEGF的蛋白含量.