【摘 要】
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研究目的：明确RANKL 对软骨的直接作用,为颞下颌关节软骨退变的治疗提供新思路.研究方法：体外ATDC5 细胞实验,明确RANKL 对软骨细胞的作用.体外培养牛软骨片,明确RANKL 对软骨组织的作用.Western 蛋白印迹检测细胞中ADAMTS5、MMP13、RANK 的表达,RT-qPCR 检测细胞中Col2a1、Col10a、RANK、RANKL、MMP13、ADAMTS5 的表达,Al
【机 构】
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上海交通大学医学院附属第九人民医院口腔外科
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研究目的：明确RANKL 对软骨的直接作用,为颞下颌关节软骨退变的治疗提供新思路.研究方法：体外ATDC5 细胞实验,明确RANKL 对软骨细胞的作用.体外培养牛软骨片,明确RANKL 对软骨组织的作用.Western 蛋白印迹检测细胞中ADAMTS5、MMP13、RANK 的表达,RT-qPCR 检测细胞中Col2a1、Col10a、RANK、RANKL、MMP13、ADAMTS5 的表达,Alcian 蓝和Safranin O 染色及 Mankin 评分分析软骨组织的破坏程度.采用SPSS17.0 软件包对数据进行统计学分析.研究结果：在软骨分化过程中,RANKL 和RANK 的表达随时间增多(P＜0.05).外源性RANKL 刺激可使软骨细胞的RANK 上调.相对于对照组,RANKL 刺激后的ATDC5 细胞中与软骨退变相关的蛋白MMP13 和ADAMTS5 的表达显著升高,且呈浓度依赖性(P＜0.05).而软骨标志因子Ⅱ 型胶原和Ⅹ型胶原的 m RNA 水平显著下降(P＜0.05).体外培养牛软骨片发现,外源性RANKL 刺激可导致软骨基质降解,结构紊乱,蛋白多糖丢失(P＜0.05).研究结论：软骨细胞可分泌 RANKL 和 RANK. RANKL 可诱导 ADAMTS5 表达增高,直接诱导软骨细胞退变.因此,可以 RANKL 为干预靶点,作为预防和治疗颞下颌关节软骨退变的新途径.
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