【摘 要】
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目的：研究let-7e对LPS诱导的人原代单核细胞产生的TNF-α表达的影响及其机制。方法：流式细胞术检测所分离的人原代单核细胞的纯度；let-7e mimic或阴性对照(NC)瞬转原代单核细胞24h、36h、48h,qRT-PCR和免疫荧光法检测其转染效率；采用1μg/ml LPS刺激原代单核细胞1、3、6、12h后,ELISA法检测细胞培养上清中TNFα的浓度,筛选出LPS最佳刺激时间；qRT
【机 构】
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中山大学中山医学院;教育部热带病防治研究重点实验室 广东省器官捐献和移植免疫重点实验室;中山大学附
【出 处】
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中国免疫学会第十届全国免疫学学术大会
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目的：研究let-7e对LPS诱导的人原代单核细胞产生的TNF-α表达的影响及其机制。方法：流式细胞术检测所分离的人原代单核细胞的纯度；let-7e mimic或阴性对照(NC)瞬转原代单核细胞24h、36h、48h,qRT-PCR和免疫荧光法检测其转染效率；采用1μg/ml LPS刺激原代单核细胞1、3、6、12h后,ELISA法检测细胞培养上清中TNFα的浓度,筛选出LPS最佳刺激时间；qRT-PCR法及ELISA法检测let7e对LPS诱导的TNFα的影响；Western blot法检测瞬转let-7e mimic后EZH2的表达水平以及瞬转siEZH2后ARFIP2和ARFGAP1的表达水平。
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