Hsps基因在小鼠胚胎后肢正常发育和异常发生过程中的表达

来源 :中国环境诱变剂学会致突变、致畸学术讨论会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:philiploo
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  背景与目的:研究热休克蛋白(heat shock proteins,Hsps)基因在小鼠胚胎后肢正常发育和异常发生过程中的表达情况.材料与方法:ICR小鼠受孕后,将其随机分为实验、对照两组,实验组和对照组各56只.于孕11 d(gestational day 11,GD11),经口灌胃一次给予实验组孕鼠80 mg/kg的全反式视黄酸、对照组孕鼠给予等体积的大豆油,并分别于GD12~GD18取两组胎鼠的后肢,利用实时荧光定量PCR检测Hsps家族各基因的表达丰度(各基因引物序列此处不列出).PCR反应体系如下:SYBR buffer 6.5μl,eDNA 1.0μl,上下游引物各0.75μl,Mili Q水16.0μl.反应条件为:95℃ 10min,95℃ 15 s、60℃ 1min(40个循环).结果:6个家族的36种Hsps在实验组和对照组后肢中均有表达,除HspA2外,其它基因在实验组和对照组的表达有明显差异.实验组后肢的表达水平高于(P<0.05)同一胚龄的对照肢的基因及时间有:Hsp 20(Hspb6)、Grp170、HspA 1A、Hspb3、HspA 14、HspA9、Hsp90AB1、Trap1、Hsp 105、Hsp25、HspA8在GD 12-GD 18,HspB5、HspB7、Hsp 90AA1、Hsp27、Hsp40、Hsp65在GD12-GD17,HO-1、HspA 1B在GD 12-GD 15,HspB2、HspB10、HspA 12A、HspB9、pg1、HspB4、Grp78、HspA 12B在GD 16-GD 18,HspA 1L、Hsp22、Hsp10、Hsp60在GD17-GD18.实验组后肢的表达水平低于(P<0.05)同一胚龄的对照肢的基因及时间有:Hspa13、Grp94、Hsp110在GD12-18,HspA1L、HspB8、Hsp10、Hsp60在GD 12-GD 16,Hsp47、HspB2、HspB10、HspA 12A、Apg1、HspB4、Grp 78在GD12-GD15,HspB9在GD12-GD14,HspA12B在GD15,HspA 1B在GD16,Hsp27、Hsp40、Hsp65在GD 18.结论:HspA1L、HspB8 (Hsp22)、Hsp 10、Hsp60、Hsp47、HspB2、HspB10、 HspA12A、Apg1、HspB4、Grp78、HspB9在小鼠胚胎后肢的正常发育及异常发生时可能有重要作用,HspA 13、Grp94、Hsp110可能是小鼠后肢的发育相关基因.
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