【摘 要】
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猪圆环病毒2型(PCV2)是危害全球规模化养猪业的重要病原之一, 疫苗接种是预防PCV2相关性疾病(PCVAD)的重要措施.PCV2有两个主要的开放阅读框ORF1和ORF2,分别编码复制相关蛋白
【机 构】
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西北农林科技大学动物医学院,杨凌,712100
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医病理学分会第二十次学术研讨会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会第十九次学术研讨会
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猪圆环病毒2型(PCV2)是危害全球规模化养猪业的重要病原之一, 疫苗接种是预防PCV2相关性疾病(PCVAD)的重要措施.PCV2有两个主要的开放阅读框ORF1和ORF2,分别编码复制相关蛋白(Rep蛋白)和核衣壳蛋白(Cap蛋白),其中Cap蛋白含有病毒主要抗原表位,是研究PCV2基因工程苗的主要候选目的基因.本研究拟构建和优化表达PCV2 Cap蛋白的腺病毒载体,为进一步研究PCV2重组腺病毒基因工程疫苗的奠定基础.WPRE是一个强大的病毒转录后调控元件，可以提高基因表达的效率，通过参与RNA polyA修饰、RNA出核和RNA翻译等过程对目的基因表达进行调控。本研究将intronA和WPRE分别插入Cap基因上下游，成功构建了优化型表达PCV2 Cap蛋白的腺病毒载体，在大肠杆菌BJ5183重组后，PacⅠ酶切后转染HEK293细胞，连续传代5代，经RT-PCR和WesternBlot鉴定，成功构建了4种重组腺病毒:rAd-Cap,rAd-intron A-Cap,rAd-Cap-WPRE,rAd-intron A-Cap-WPRE，且TCID50均在10-9/100 μL以上。
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