【摘 要】
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目的 研究环境中磺胺类耐药菌的分析工作,检测相关抗性基因在这些耐药菌中的分布和表达规律。方法 采用抗性平板筛选法和实时荧光定量PCR方法,比较施用和未施用过猪粪肥的耕作土壤中磺胺类耐药菌及其相关抗性基因(sul1,sul2和sul3)的种群和分布特征。结果 从12个施用猪粪肥和3个未施用猪粪肥的土壤样品中分别分离到172株和38株磺胺类耐药菌菌株,根据主要形态特征和16s rDNA序列,可分为5个
【机 构】
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环境保护部南京环境科学研究所,江苏南京210042 中国药科大学生命与科学技术学院,江苏南京210
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目的 研究环境中磺胺类耐药菌的分析工作,检测相关抗性基因在这些耐药菌中的分布和表达规律。方法 采用抗性平板筛选法和实时荧光定量PCR方法,比较施用和未施用过猪粪肥的耕作土壤中磺胺类耐药菌及其相关抗性基因(sul1,sul2和sul3)的种群和分布特征。结果 从12个施用猪粪肥和3个未施用猪粪肥的土壤样品中分别分离到172株和38株磺胺类耐药菌菌株,根据主要形态特征和16s rDNA序列,可分为5个细菌类群20个属。基于16s rDNA文库的分析结果显示：放线菌门(Actinobacteria)和变形细菌门(Proteobacteria)是这两种不同类型土壤中共同的优势类群,而TM7和疣微菌门(Verrucomicrobia)是属于施用猪粪肥土壤中的特征菌属,armatimonadetes类细菌则属于未施用猪粪肥土壤样品中的特征菌。在从冬季土壤中分离到的122株耐药菌中,sul2主要分布于基因组DNA上,sul1基因主要分布于这些菌株的质粒DNA中；此外,仅从两份土壤样品来源的5株耐药菌的基因组或质粒DNA检测到sul3基因。而在夏季土壤样品来源的50株耐药菌菌株中,sul1基因主要分布于基因组DNA上,sul2则主要分布于质粒DNA上,仅有来源于一份土壤样品的1株菌的质粒DNA上含有sul3基因。从sul基因在不同菌属中的分布情况来看：sul1和sul2基因主要分布于芽孢杆菌属(Bacillus)和志贺氏菌属(Shigella)细菌中。结论 3种抗性基因在耐药菌遗传物质中普遍分布的性；一些菌属具有磺胺类耐药基因。
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