【摘 要】
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目的 体外观察shRNA 靶向干扰硒蛋白V(SELV)基因对人恶性黑色素瘤A375 细胞生物学行为的影响.方法 构建以SELV 为靶基因的shRNA 表达载体,将其转染至体外培养的A375 细胞中,并利用嘌呤霉素筛选出稳定转染细胞株.采用实时荧光定量反转录PCR(qRT-PCR)和Western blotting 法分别检测转染细胞SELV 的mRNA 和蛋白表达水平;采用MTT 法检测转染后细胞
【机 构】
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深圳市慢性病防治中心 上海交通大学公共卫生学院;深圳市慢性病防治中心
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目的 体外观察shRNA 靶向干扰硒蛋白V(SELV)基因对人恶性黑色素瘤A375 细胞生物学行为的影响.方法 构建以SELV 为靶基因的shRNA 表达载体,将其转染至体外培养的A375 细胞中,并利用嘌呤霉素筛选出稳定转染细胞株.采用实时荧光定量反转录PCR(qRT-PCR)和Western blotting 法分别检测转染细胞SELV 的mRNA 和蛋白表达水平;采用MTT 法检测转染后细胞的增殖能力,并利用流式细胞术检测转染细胞的细胞周期和早期凋亡率.
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