【摘 要】
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品种纯度是杂交种重要的质量参数,但油菜的生物学特性决定了制种过程中往往因不育系有微粉或外来花粉导致杂交种纯度降低,影响杂种优势.随着分子生物学的发展,多种分子标
【机 构】
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成都市农林科学院,四川成都,611130
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品种纯度是杂交种重要的质量参数,但油菜的生物学特性决定了制种过程中往往因不育系有微粉或外来花粉导致杂交种纯度降低,影响杂种优势.随着分子生物学的发展,多种分子标记方法尤其是SSR分子标记技术被应用于油菜品种纯度和真伪的检验.本研究以三系杂交油菜品种蓉油18为实验材料,种子在培养皿内室温发芽两天后,依次取完整的单株放入200μl PCR板中,每板可放96株个体,每孔分别加入60μL提取液(配方:160μl Tween 20,160μl 5mol/L NaOH,9.68ml蒸馏水),在PCR仪中加热到95℃,保持10min,PCR板取出后每孔快速加入60μl缓冲液(配方:1ml 1mol/L Tris-Hcl,40μl 0.5mol/L EDTA,8.96ml蒸馏水),震荡混匀.分别取此提取液1μl、2μl、5μl、10μl进行琼脂糖电泳,结果发现上样量5μl以上即可以明显看到DNA电泳条带.
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