【摘 要】
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禽流感(Avian Influenza,AI)是由禽流感病毒(AIV)引起的一种高度接触性传染病,几乎所有的野生及家养禽类都可感染,该病经常给养禽业造成严重的经济损失.M2蛋白是禽流感病毒的跨膜蛋白,含有高度保守的抗原表位,是理想的交叉保护性疫苗的候选抗原.Ⅰ型马立克氏病病毒(Mareks Disease Virus,MDV)与超强毒野毒株的(vv)MDV抗原性更为接近,因此它可用作活疫苗和多价疫
【机 构】
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北京市农林科学院畜牧兽医研究所(北京海淀) 中国农业大学动物医学院
【出 处】
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中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会
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禽流感(Avian Influenza,AI)是由禽流感病毒(AIV)引起的一种高度接触性传染病,几乎所有的野生及家养禽类都可感染,该病经常给养禽业造成严重的经济损失.M2蛋白是禽流感病毒的跨膜蛋白,含有高度保守的抗原表位,是理想的交叉保护性疫苗的候选抗原.Ⅰ型马立克氏病病毒(Mareks Disease Virus,MDV)与超强毒野毒株的(vv)MDV抗原性更为接近,因此它可用作活疫苗和多价疫苗的载体.将禽流感病毒M2基因克隆于真核表达质粒pIRES-EGFP中,使其位于pCMV启动子的调控下,并与绿色荧光蛋白基因(EGFP)串联后,将上述串联基因插入到含MDV CVI988的鸡胚成纤维细胞,利用同源重组的方法,筛选了表达禽流感病毒M2基因的重组病毒MDV1.经PCR、Dot-blotting,Western-blotting等实验的结果表明,禽流感病毒M2基因的确插入到MDV1(CVI988)基因组中并获得表达.重组MDV1免疫1日龄SPF鸡21天后,用ELISA可检测到M2蛋白的特异性抗体.
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1日龄雏番鸭经肌内注射、口服、点眼和喷雾等途径免疫番鸭呼肠孤病毒活疫苗,7天后攻毒,结果表明:肌内免疫组保护率为100﹪、口服免疫组保护率为87.5﹪、点眼组保护率为12.5﹪、喷雾组保护率为25﹪;血液淋巴细胞转化能力测定结果显示:肌内免疫组淋巴细胞活性最高、口服免疫组次之、点眼组第3、喷雾组最差,与对照组无显著差异,与攻毒保护结果类似,证明:番鸭呼肠孤病毒活疫苗以肌肉注射免疫效果最好,口服免疫
0.4﹪甲醛灭活后血凝价为0的二株禽流感H5亚型病毒制备的油乳剂疫苗免疫140日龄蛋鸡,疫苗免疫10天后HI抗体水平分别升到8.0Log2、6.2Log2以上,免疫后17-24天HI抗体水平升到高峰(8.8Log2、7.8Log2),免疫38天后能抵御剂量为4ELD的同种强毒的攻击.结果表明灭活后血凝价为0的禽流感H5亚型病毒与灭活后血凝价为5的病毒抗原的免疫原性没有显著差异.
自福建、浙江和广东等省表现典型神经症状、心肌坏死和胰腺坏死等特征性病症的水禽(鸭、鹅)分离的流感病毒,经血清学鉴定其亚型均为H5.为从分子水平探究以上地区水禽流感病毒的变异和毒株的进化关系,本研究应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从福建分离鉴定的2株鹅源流感病毒中扩增出流感病毒HA基因编码区,并构建重组质粒,最后对重组质粒进行了序列分析.分析发现,两分离毒株间的核苷酸同源性为99.8﹪
为研究水禽流感大规模爆发的机理,我们开展了水禽流感病例中并发病原的研究.根据已发表的鹅圆环病毒(GoCV)序列,设计了一对检测引物,对永康发病鹅病例样品进行PCR扩增,扩增出552bp的特异片段,经测序确证GoCV的存在.根据测定的序列进一步设计反向扩增引物,经扩增、测序、拼接后获得GoCV全基因组序列.基因组序列分析表明,浙江永康株GoCV-yk01全长1821bp,具有圆环病毒共同的与病毒复制
采用鸡胚接种和细胞培养的方法从广西武鸣某鹅场患病鹅脑、肝、脾中分离到两株病毒,经RT-PCR、HA、HI试验等研究,该分离毒为鹅副粘病毒.该毒株对鸡胚半数致死量(ELD)为10/0.1ml,对鸡胚成纤维细胞的半数感染量(TCID)为10/0.1ml.根据鸡新城疫病毒毒力测定的标准,测定分离株最小致死量的鸡胚平均死亡时间(MDT)为38.8h,1日龄雏鸡脑内接种致病指数(ICPI)为2,将分离毒10
2002年徐镔蕊通过对自然发生骨髓细胞瘤病的蛋鸡经过病理组织学、免疫组化及PCR检测,首次发现蛋鸡J亚群禽白血病(ALV-J).本实验采用临床发病的蛋用型鸡的病料,过滤除菌后接种于用11日龄的SPF鸡胚制备的鸡胚成纤维细胞(CEF).用ALV-Jgp85特异性单抗进行间接荧光抗体法(IFA)检测接种的CEF,结果呈阳性.提取接种病料的CEF的总RNA作反转录聚合酶链式反应(RT-PCR),在pol
利用SPF鸡胚对鸡传染性法氏囊病超强毒vvIBDV-Gx株进行培育,通过鸡胚成纤维细胞对病毒进行传代致弱,使其成为弱毒株IBDV-Gt.从细胞适应毒中提取病毒dsRNA,通过反转录,使用Long-accurate PCR(LA-PCR)用一对引物一步直接扩增IBDV-Gt基因组A节段全长cDNA的方法,得到一约3.30kb的片段.测序结果证明已获得3255bp的A节段全长,对vvIBDV-Gx株和
从圭亚那进口的金刚鹦鹉泄殖腔拭子中分离到一株新城疫病毒(ZPS),该毒株鸡胚平均致死时间(MDT)为55.2h,脑内致病指数(ICPI)为2.0静脉致病指数(IVPI)为2.57,表明该毒株属强毒株.根据从GenBank上查到的NDV融合蛋白(F)基因的序列,设计特异性引物,克隆了F基因5端部分核酸序列,由此推导了F蛋白的氨基酸序列,并对该毒株的基因型分类地位进行了初步分析.所测的核苷酸序列大小为
本研究对来自香港和世界各地的10株庞物鸟H3N8流感病毒的HA基因进行了全基因序列测定,用DNASTAR和Tree View软件进行序列编辑,序列翻译,进化树绘制和分子演化分析.结果表明来自不同国家和地区的H3N8流感病毒的HA基因都非常相似,都形成一个独立的分支,属于欧亚亚系,同源率为95.9-100﹪;香港2001年庞物鸟的毒株之间的同源率最高,分别为99.2-100﹪.HA基因与A/Equi
用威兰VD-28、英特威CVI988、梅里亚CVI988、南京中牧公司CVI988和北京兽医生物药品厂814等五种MD疫苗分别经皮下注射免疫1日龄SPF鸡,并选用梅里亚CVI988疫苗进行胚胎免疫和二次免疫试验.所有试验鸡于免疫后21日龄用10稀释的京-1株强毒进行攻击,测得五种疫苗保护率分别为18/20、20/20、19/20、20/20和19/20.各疫苗一次免疫组间保护率虽有差异但都不显著(