鱼类主要过敏原小清蛋白的提取纯化及其单克隆抗体的制备

来源 :2016上海市食品学会年会暨上海市“食品·创新·绿色·共享”研究生学术论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ftlfh
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
  制备鱼类主要过敏原小清蛋白单克隆抗体。使用硫酸铵分段盐析法提取、纯化鲫鱼小清蛋白,使用SDS-PAGE对蛋白纯度进行鉴定。将纯化后的小清蛋白作为过敏原免疫BALB/c小鼠,取血清效价最高的小白鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,经间接ELISA筛选阳性孔、有限稀释法亚克隆、体内扩大生产制备灵敏度高、特异性强的小清蛋白单克隆抗体。并通过SDS-PAGE、western-blotting、试剂盒对单克隆抗体的纯度、特异性、亚型进行鉴定。
其他文献
以新鲜裙带菜为原料,利用胃蛋白酶、胰蛋白酶、复合蛋白酶、Alcalase碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶对裙带菜蛋白质进行酶解,并通过单因素实验,考察酶解时间、酶解温度、酶解pH、加酶量、底物浓度对于水解度的影响.结果 表明,复合蛋白酶酶解效果较好,裙带菜最佳酶解条件为酶解时间7.87h,pH为7.19,温度49.2℃,加酶量0.2%,底物浓度15g/L,在最佳条件下的水解度为29.72%.
以南极磷虾中分离的59株菌为研究对象,利用酪蛋白水解圈法对其进行产蛋白酶菌株的筛选,并对菌株的形态特征及部分生理生化特征进行研究,以比浊测定法对活性菌株生长的部分特性包括生长曲线、产酶曲线、最佳温度、最佳pH、最佳盐度进行研究,以福林酚法对蛋白酶酶活以及其部分酶活特性包括蛋白酶作用最适温度、最佳pH、热稳定性等进行探宄.以l6S rRNA基因扩增法和Mega5邻接法对活性菌株进行系统发育树的构建及
鲜切生菜主要应用于西餐产业中,随着麦当劳,肯德基等快餐店的普及,对其需求量也越来越大。鲜切生菜作为市场消费的主流,必须保证它有较长的保鲜期,提高经济价值。怎样有效保鲜鲜切生菜成为食品工作者研究的课题。因此,研究出既能够保持鲜切生菜原有营养品质,又能控制鲜切生菜腐败的保鲜剂,对提高生菜价值和延长鲜切生菜货架期有重要的意义。本文章参考其他著作和相关实验,综述了天然保鲜剂、化学保鲜剂等不同类型保鲜剂对鲜
本文旨在筛选具有产广谱、高效抑菌活性物质的海洋放线菌,为新型抗生素的开发奠定基础.采用琼脂块法初筛,打孔扩散法复筛,以金黄色葡萄球菌、大肠埃希氏菌、枯草芽孢杆菌和单核细胞增生李斯特菌为指示菌从海泥样品中筛选目标菌株;利用20种指示菌株考查Y10、Y11、Y15、Y16和Y21的抑菌谱;通过形态观察和16S rRNA基因序列分析确定菌株分类地位;以单核细胞增生李斯特菌的0D600值为指标探讨Y15抑
鱼油营养丰富,含高不饱和脂肪酸,对氧气、光和热很敏感,容易发生氧化。鱼油一旦发生氧化,不仅对健康无益,反而会对人体造成极大的危害。而抗氧化剂是食品添加剂的一个重要组成部分,它可以用来阻止或延缓油脂的氧化,进而可以维持鱼油的稳定,并延长鱼油储藏的货架期。因此,有必要探索一种适合的抗氧化剂去解决甲鱼鱼油的贮存问题,防止鱼油的腐败氧化。本文主要综述了鱼油的不饱和脂肪酸的纯化及抗氧化活性,为以后对甲鱼油的
本文旨在从滋味角度探究红鳍东方鲀美味的奥秘,利用高效液相色谱、氨基酸自动分析仪、原子吸收光谱和紫外吸收光谱等方法分析测定了生鲜红鳍东方鲀肌肉中水溶性滋味物质,分析了各滋味物质的滋味活性值(taste activity value,TAV),并通过感官减除实验对红鳍东方鲀肌肉中特征鲜味物质进行分析.结果 表明:IMP的TAV值为8.52远大于1,说明具有鲜味的IMP对红鳍东方鲀特征滋味具有显著的贡献
沙蚕是常见的环节动物门海生动物,生长在河口附近或海岸的滩涂.沙蚕属于药食同源的海洋生物,沙蚕也是鱼虾的天然饲料.沙蚕具有补脾益胃、补血养血、利水消肿等药理药效作用.沙蚕营养成分丰富,氨基酸含量占沙蚕干重的67.43%,脂肪酸含量占沙蚕干重的14.24%,其中EPA含量为6.53%,沙蚕还含有Cu、Sn、Se、Hg、As、I、Zn和Cd等多种微量元素.沙蚕中丰富的羟脯氨酸、脂肪酸、纤维蛋白溶解酶、纤
溶菌酶是一种碱性蛋白酶,在体内免疫系统中对抵抗微生物感染具有重要作用。本文主要介绍溶菌酶的分类、结构及其作用机制。主要对i型溶菌酶的基因组结构与特征进行分析,对i型溶菌酶的系统发育进行了比对,同时根据最近的研究来分析i型溶菌酶的组织分布。目前,i型溶菌酶在原核表达系统与真核表达系统中均已成功的表达出重组溶菌酶,重组的溶菌酶都表现出抑菌活性。由于溶菌酶的价值所在,其在食品行业、医疗行业等均有广泛的应
防御素是机体在长期的进化过程中保留下来的古老的宿主防御机制中的重要组成成分,在生物体的先天性免疫系统中发挥重要的作用,是抵御外来微生物入侵的重要物质。防御素是抗菌肽中的一个大家族,是一种富含半胱氨酸的内源性小分子多肽,对细菌等微生物具有广谱抗性,同时对某些恶性肿瘤细胞也有毒杀作用,其在感染性疾病的控制以及禽畜生产中都具有广阔的应用前景。迄今为止,国内外对海洋生物来源的防御素已经进行了大量的研究,并
目的 对抗肿瘤活性肽QX3-1融合蛋白在大肠杆菌中的表达条件进行优化,以获得更多的融合蛋白.方法 通过改变影响QX 3-1-pED/BL21重组菌在大肠杆菌中表达量的培养基、诱导温度、乳糖诱导剂的浓度和诱导时间等条件,分别进行SDS-PAGE,并用Band Scan凝胶分析软件来分析以上条件对目的蛋白的表达量的影响.结果 QX 3-1-pED/BL21重组菌在酪蛋白胨培养基中,于37℃条件下,用1