褐飞虱胱硫醚β-合成酶基因的克隆及功能分析

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水稻韧皮部汁液营养极不均衡,特别是必需氨基酸严重缺失。褐飞虱取食水稻后,主要依赖体内类酵母共生菌协同合成必需氨基酸以满足自身生理过程。其中,褐飞虱与类酵母共生菌参与的硫同化途径及其对含硫氨基酸的影响尚未可知。本文针对硫同化途径中关键基因胱硫醚β-合成酶(cystathionineβ-synthase),从褐飞虱及其类酵母共生菌基因组中各得到一个基因并分别命名为NlCBS及EdeCBS。NlCBS与昆虫的CBS高度相似达65%~74%,其中与烟粉虱Bemisiatabaci的CBS一致性最高(74%)。EdeCBS与真菌的CBS高度相似达60%~67%,其中与淡紫紫孢菌Purpureocillium lilacinum的CBS一致性最高(67%)。分别注射dsGFP、dsNlCBS、dsEdeCBS和dsNlCBS+dsEdeCBS至褐飞虱体内后2天,与对照组相比,dsNlCBS和dsNlCBS+dsEdeCBS处理组中NlCBS的表达量分别显著下降了45%和86%,而dsNlCBS+dsEdeCBS处理组中EdeCBS的表达量显著上升了90%。注射dsRNA后6天后,dsNlCBS、dsEdeCBS和dsNlCBS+dsEdeCBS处理组中NlCBS的表达量分别显著下降了54%、32%和84%,EdeCBS的表达量亦分别显著下降了24%、66%和70%。生测结果表明,与对照组相比,dsNlCBS、dsEdeCBS和dsNlCBS+dsEdeCBS使初羽化雌虫的体重分别下降了4%、4%和8%,血淋巴中甲硫氨酸的含量下降了11.2%、20.8%和12.8%,总氨基酸含量下降了3.6%、20.7%和13.7%。本研究结果表明NlCBS和EdeCBS共同参与褐飞虱甲硫氨酸的合成,为进一步研究褐飞虱与类酵母共生菌在氨基酸合成中的协同关系提供了依据。
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