【摘 要】
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腺苷甲硫氨酸(SAM)依赖型蛋白质甲基化是一种重要的翻译后修饰现象。由于甲基化可以发生在N-,O-和S-中心,并且在N-中心甲基化还存在不同状态,人们对甲基化蛋白质组了解得
【机 构】
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中国科学院大连化学物理研究所,大连市中山路457号,大连 116023
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腺苷甲硫氨酸(SAM)依赖型蛋白质甲基化是一种重要的翻译后修饰现象。由于甲基化可以发生在N-,O-和S-中心,并且在N-中心甲基化还存在不同状态,人们对甲基化蛋白质组了解得还很不深入。一些非常有挑战性问题至今没有答案,如,蛋白质组甲基化程度如何？蛋白质甲基化的氨基酸选择性如何？蛋白质N-甲基化状态分布如何？为回答这些问题,我们构建了SAM-营养缺陷型酿酒酵母菌株,设计同位素标记SAM的甲基化策略结合在线多维μHPLC/MS/MS技术实现了对酿酒酵母甲基化蛋白质组的高可信度分析。鉴定了73个甲基化蛋白,包括分布在109个甲基化中心的113个甲基化事件,其中超过95％的甲基化事件是首次发现。这是迄今为止最全面的酵母蛋白质甲基化组数据。分析表明,1)超过4％的酵母蛋白质存在甲基化；2)甲基化发生在氨基酸残基的顺序为Lys＞＞Arg＞Asp＞Glu ≈ Asp ≈ Gln ≈ His＞Cys；3)N-甲基化状态存在一定的互斥性。研究结果极大地丰富了对蛋白质甲基化的科学认识。
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