【摘 要】
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目的 通过观察维生素D 受体激动剂活性维生素D(1,25-(OH)-2D3,VitD3)及其类似物埃罗骨化醇(BXL-628)对高糖诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)RhoA 活化的影响,研究其对HK-2 细胞间充质转分化及细胞外基质的作用,并探讨其可能机制.方法 (1)体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,使用高糖培基(30 mmol/L)刺激HK-2 细胞,观察不同时间点活性RhoA 蛋白以及α-平
【机 构】
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中南大学湘雅三医院肾内科 410013
【出 处】
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中华医学会肾脏病学分会2014年学术年会
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目的 通过观察维生素D 受体激动剂活性维生素D(1,25-(OH)-2D3,VitD3)及其类似物埃罗骨化醇(BXL-628)对高糖诱导人肾小管上皮细胞(HK-2)RhoA 活化的影响,研究其对HK-2 细胞间充质转分化及细胞外基质的作用,并探讨其可能机制.方法 (1)体外培养人肾小管上皮细胞HK-2,使用高糖培基(30 mmol/L)刺激HK-2 细胞,观察不同时间点活性RhoA 蛋白以及α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E 钙粘素(E-cadherin)蛋白及mRNA的表达;(2)将HK-2 细胞设正常对照组(葡萄糖5.6 mmol/mL)、高糖(葡萄糖30 mmol/mL)组、VitD3 组(高糖+VitD3,10-7mol/L)组、BXL-628 组(高糖+BXL-628,10-8mol/L),使用qPCR、Western Blot 方法观察各组细胞48 h α-SMA、E-cadherin 蛋白及mRNA 的表达;采用Elisa酶联免疫法及q PCR 方法检测各组细胞48h I 型胶原蛋白(Collagen-Ⅰ,col-Ⅰ)、纤维连接蛋白(Fibronectin,Fn)蛋白及mRNA 的表达.分别使用Western Blot 免疫印迹法及免疫荧光技术检测各组细胞2 h 活性RhoA 蛋白的表达情况.
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全球慢性肾脏病(CKD)的患病率不断增长,随着老龄化社会的来临,CKD 的患病率将进一步增加.终末期肾衰竭(ESRD)的患者只能依赖肾脏替代治疗(透析或肾移植)生存,费用及其昂贵,因此,ESRD 被称作"花钱最多的疾病",被列入我国今后十年―国家医学发展战略"中优先研究的重大疾病.但是,目前临床上用于治疗慢性肾脏病的手段和药物少之又少,而针对肾脏纤维化的治疗几乎为零.因此,阐明肾脏纤维化的机制是延
肾脏疾病,同心脑血管疾病、肿瘤这些慢性病一样,发病率、知晓率逐年上升,也越来越受到人们更多的关注.10多年前世界卫生组织召集多位专家,结合病因学和病理学,对肾脏疾病进行了一次系统分类,将肾脏疾病分为肾小球疾病、肾小管-间质疾病、肾血管疾病、肾发育及遗传性疾病等.随着现代医学的进展,肾脏疾病的诊断技术也得到了突飞猛进的发展.
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