【摘 要】
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目的 建立实时荧光定量PCR技术检测载脂蛋白A5(apoA5)基因在人肝癌细胞株HepG2中表达.方法 用不同浓度D-葡萄糖(5mm、10mm、15mm、20mm、25mm)和不同浓度果糖、半乳糖、甘露糖(5mm、25mm)培养HepG2细胞24小时,及25mm D-葡萄糖不同时间培养的HepG2细胞(6h、12h、24h、48h)分别提取细胞总RNA,并逆转录扩增apoA5的cDNA, 用RT-
【机 构】
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南京大学医学院附属南京鼓楼医院检验科,南京 210008 东南大学医学院,南京 210008
【出 处】
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中国工程科技论坛第115场——临床分子诊断暨第二届中国分子诊断技术大会
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目的 建立实时荧光定量PCR技术检测载脂蛋白A5(apoA5)基因在人肝癌细胞株HepG2中表达.方法 用不同浓度D-葡萄糖(5mm、10mm、15mm、20mm、25mm)和不同浓度果糖、半乳糖、甘露糖(5mm、25mm)培养HepG2细胞24小时,及25mm D-葡萄糖不同时间培养的HepG2细胞(6h、12h、24h、48h)分别提取细胞总RNA,并逆转录扩增apoA5的cDNA, 用RT-PCR和实时定量PCR检测apoA5基因表达的变化.结果 D-葡萄糖、果糖、半乳糖、甘露糖可使apoA5基因的表达量呈浓度依赖性促进入肝癌细胞株中apoA5基因的表达(P＜0.01).高浓度的D-葡萄糖可使apoA5基因的表达量呈时间依赖性促进人肝癌细胞株中apoA5基因的表达(P＜0.01).结论 葡萄糖及不可代谢糖能够促进apoA5基因表达,而apoA5基因表达可能在糖尿病病人,尤其在糖尿病的发生、发展过程中起重要作用.本实验将为高甘油三酯血症、冠心病、2型糖尿病、代谢综合征等疾病的预防、诊断、病因学分析及治疗提供有用的帮助,为将来探索ApoA5应用于临床成为预防、治疗高甘油三酯血症、糖尿病和动脉粥样硬化的理想药物奠定基础.
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