【摘 要】
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目的:研究人血小板裂解液在成人牙髓干细胞向成牙本质细胞分化过程中的作用,探讨其在成人牙髓干细胞向成牙本质细胞诱导培养过程中的应用前景。方法:采用单细胞克隆的方法,
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目的:研究人血小板裂解液在成人牙髓干细胞向成牙本质细胞分化过程中的作用,探讨其在成人牙髓干细胞向成牙本质细胞诱导培养过程中的应用前景。方法:采用单细胞克隆的方法,获得成人牙髓干细胞。扩大培养细胞克隆,检测波形丝蛋白(Vimentin)及STRO-1的表达,成脂诱导后Oil Red2O染色。体外:在常规矿化诱导培养液液中按体积比加入1%、5%的人血小板裂解液,常规矿化诱导培养液为对照组,常规培养液为空白组,分别作用于二维贴壁培养、复合HA/TCP支架材料培养的牙髓干细胞,按特定时间节点测定ALP活性、茜素红染色定量分析、MTT法测定细胞增殖率、DSP免疫组化染色,并进行RT-PCR检测DSP的表达。体内:将经过各组培养液二维平面培育后的成人牙髓干细胞分别进行接种HA/TCP支架材料及填入成人离体牙根管,植入裸鼠背部皮下,8周后取材,行组织学、DSP免疫组化染色观察。结果:单细胞来源的克隆波形丝蛋白、STRO-1表达阳性,Oil Red2O染色阳性。体外研究,二维贴壁培养、复合HA/TCP支架材料培养的牙髓干细胞,在含5%血小板裂解液组细胞的ALP活性、茜素红染色定量、MTT法测定细胞增殖率的指标均高于其他组,DSP的表达亦高于其余三组。体内研究,含1%血小板裂解液组、含5%血小板裂解液组、常规矿化液组均能观察到少量牙本质牙髓复合体样结构,DSP免疫组化染色均为阳性。结论:提示了一定体积浓度比的人血小板裂解液,可能在成人牙髓干细胞向成牙本质细胞分化的体内外过程中起到促进作用。
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