【摘 要】
：
目的：本研究拟从青环海蛇蛇毒中筛选获得一类以TNFR1为特异性靶点的抗炎活性肽,并从分子、细胞和动物水平对其抗炎能力进行评价,为进一步研究抗炎候选药物奠定基础。方法：利用T7 Selectl0-3 Orient Express cDNA Cloning System构建了滴度为2.5×106pfu的青环海蛇蛇毒毒腺噬菌体展示文库；并建立了使用TNFR1淘选海蛇蛇毒抗炎活性成分的方法，获得了一种海蛇
【机 构】
：
Department of Biochemical Pharmacy,School of Pharmacy,Second Military Medical University,Shanghai 20
【出 处】
：
中国药理学会抗炎免疫药理专业委员会成立30周年纪念大会暨2012年学术年会
论文部分内容阅读
目的：本研究拟从青环海蛇蛇毒中筛选获得一类以TNFR1为特异性靶点的抗炎活性肽,并从分子、细胞和动物水平对其抗炎能力进行评价,为进一步研究抗炎候选药物奠定基础。方法：利用T7 Selectl0-3 Orient Express cDNA Cloning System构建了滴度为2.5×106pfu的青环海蛇蛇毒毒腺噬菌体展示文库；并建立了使用TNFR1淘选海蛇蛇毒抗炎活性成分的方法，获得了一种海蛇蛇毒肽TR220； BIACORE分析发现海蛇蛇毒肽TR220可直接与偶联在芯片上的TNFR1,TNFR2及TNF-a结合，解离常数(KD值)分别为32.4gM,0.22mM和2.02mM；竞争性实验表明在一定浓度范围内海蛇蛇毒肽TR220能够有效抑制TNF-a与其两种受体的结合。结果：MTT结果表明海蛇蛇毒肽TR220在一定浓度范围内对L929细胞能够呈剂量依赖地抑制TNF-a的生物活性，20nM时效果最佳(抑制率为46％，p<0.01)，且在该剂量范围内自身无明显细胞毒性。结论：BIACORE分析、细胞实验、LPS小鼠急性休克模型、DSS诱导的小鼠急性结肠炎模型等实验结果表明，海蛇蛇毒肽TR220具有显著的抗炎活性，可能是一种潜在的选择性TNF-a受体阻断剂，这为进一步研究该抗炎候选药物奠定了基础。
其他文献
目的：探讨1,3-二苯基-1,2,3,6-四氢嘧啶-4,5-二甲酸二乙酯(LH-2703)体内、体外的抗炎镇痛活性。方法：醋酸所致小鼠扭体反应和热板致痛模型评价镇痛作用；二甲苯致小鼠耳廓肿胀和角叉菜胶致大鼠足跖肿胀模型评价抗炎作用。细菌脂多糖(LPS,10μg/mL)刺激小鼠腹腔巨噬细胞活化作为体外炎症模型。酶免疫分析法(EIA)检测前列腺素E2(PGE2)的含量，Griess试剂法检测一氧化氮(
目的：研究薯蓣皂苷对体外培养的小鼠成骨细胞MC3T3-E1增殖以及分化的影响,并初步探讨薯蓣皂苷预防以及治疗骨质疏松的作用机制.方法：在体外培养的小鼠成骨细胞MC3T3-E1的DMEM培养基中分别加入不同浓度(0.25μg/ml,0.5μg/ml,1.Oμg/ml)的薯蓣皂苷分别作用24h、48h、72h,用MTT法检测薯蓣皂苷对MC3T3-E1细胞增殖的影响.结果：(1)0.25μg/ml的薯蓣
目的：为了更加清楚的认识日益突出的药物变态反应问题。方法：归纳并总结了传统Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ型药品变态反应发生的机理，类过敏反应和迟发相变态反应学说，以及药品变态反应发生的相关因素，如特应性体质、异质性物质和分子、机体的内环境改变、T细胞亚群构成的影响、以及免疫细胞及其介质与神经-内分泌系统的相互作用。结果与结论：基于药物变态反应类型与诱发因素的多样性，提示系统研究药物变态反应作用机制的重要性。与此同
目的：研究薯蓣皂苷对TNF-α诱导的单核/内皮细胞粘附影响,并初步探讨其作用机制.方法：不同浓度的薯蓣皂苷(0.3125μg/ml、0.625μg/ml、1.25μg/ml)处理人脐静脉内皮细胞(HUVECs)。MTT法检测薯蓣皂苷对TNF-α(10ng/ml)作用后细胞增殖力的影响；Western Blot法检测薯蓣皂苷对TNF-α诱导的HUVECs中细胞粘附因子VCAM-1、ICAM-1蛋白表
目的：本研究探讨淫羊藿黄酮(epimedium flavonoids,EF)对模拟多发性硬化的实验性自身免疫性脑脊髓炎大鼠模型的干预并阐明其作用机制。方法：通过经豚鼠全脊髓匀浆免疫Lewis大鼠诱导EAE大鼠动物模型,EF在免疫后当天灌胃给药直至免疫后第14天,借助组织病理染色、酶联免疫吸附法(ELISA)、生化检测和蛋白印迹等方法评价疾病的发生率、严重程度、以及中枢神经系统炎症和神经营养情况。结
目的：研究薯蓣皂苷(dioscin)对大鼠胶原性关节炎(CIA)的治疗作用并探讨其可能的作用机制。方法：第1天大鼠左后足底皮内注射胶原乳剂制备CIA模型,第7天加强注射。第12天ig给予薯蓣皂苷30、60和120mg·kg-1,吲哚美辛8mg·kg-1,连续14d。给药前和给药开始,每4d测量1次右后足跖肿胀程度；处死后光镜观察右后足组织形态变化；检测CIA大鼠脏器指数；Western blott
目的：通过检测接受不同治疗方案的慢乙肝患者的血清白介素21(IL-21)水平,探讨药物对IL-21表达的影响.方法：198例非活动性慢乙肝患者分为干扰素治疗组(IFN,n=38)、核苷类似物治疗组(NA,n=72)和未接受任何抗病毒治疗对照组(Con,n=88)。结果：对照组和干扰素治疗组IL-21水平都显著高于核苷类似物治疗组(P<0.05)依次为102.29±14.03pg/mL,123.01
目的：采用体外抗氧化实验评价老瓜头生物总碱(C.komarrovii alkaloids,CKA)的抗氧化活性。方法：通过测定还原力,双氧水诱导小鼠红细胞溶血的保护作用,羟自由基的清除能力,脂质过氧化产物MDA的清除能力来说明CKA抗氧化活性。结果：随着CKA浓度的升高,还原力增强,浓度与还原力成正相关；CKA的浓度升高,对双氧水诱导的小鼠红细胞溶血的保护作用增强,在200μg/ml达到最大,再随
目的：研究木犀草素(luteolin)对TNF-α诱导的脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡的影响，并初步探讨其机制。方法：(1)采用不同浓度的木犀草素(6.25μM、12.5μM、25μM)预处理细胞30min后，加入TNF-α(50ng/ml)作用24小时后检测HUVECs培养上清中LDH的含量.(2)以上不同浓度的木犀草素预处理细胞22小时后，再加入TNF-α作用2小时，采用流式细胞仪检测胞内R
目的：观察蛇床子素是否通过激活过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)α调节肝细胞内的脂肪酸代谢。方法：大鼠肝细胞在用蛇床子素12.5～100μmol.L-1作用24h后,用比色法测定细胞内甘油三酯(TG)和游离脂肪酸(FFA)含量,用逆转录聚合酶链反应法测定PPARαmRNA表达的变化.为进一步明确蛇床子素的调脂作用是否与激活PPARα有关,采用PPARα抑制剂MK886 1μmol.L-1预处理