黄芩素对单核增生性李斯特杆菌溶血素的抑制作用研究

来源 :中国畜牧兽医学会兽医药理毒理学分会第十四次学术讨论会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:shlchen
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  [目的]本文旨在研究中药黄芩中存在的黄酮类天然化合物黄芩素对单核增生性李斯特杆菌重要毒力因子溶血素(LLO)的抑制作用及机制,并探索其对野生型单增李斯特菌EGD引发感染的抑制情况.[方法]实验借助溶血试验检验黄芩素对野生型EGD分泌的LLO及重组LLO(rLLO)溶血活性的抑制效果;利用western blot及β-lacZ检测试验,观察同一吸光度(600nm)下的EGD、黄芩素共培养体系中,细菌内部和培养物上清中LLO的分泌量,明确黄芩素对LLO的作用环节,并通过添加高浓度氯离子体外诱导rLLO蛋白寡聚化过程,验证药物对LLO寡聚化的影响;采用小鼠单核巨噬细胞系RAW264.7建立EGD感染的细胞模型,通过肌动蛋白染色实验和细菌胞内生长曲线的绘制进一步证明黄芩素的作用靶点,利用LDH释放试验和活死细胞染色试验,分析添加不同浓度黄芩素对EGD引起细胞损伤死亡的影响.
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