人肥大细胞类胰蛋白酶基因的克隆与鉴定

来源 :2003年中国博士后生命科学学术研讨会暨院士论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dongshengly
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目的:克隆人肥大细胞类胰蛋白酶(human mast celltryptase,HMC-Try)cDNA。 方法:根据GenBank中HMC-Try基因序列,设计PCR引物,用RT-PCR方法,从人包皮组织中获取HMC-Try cDNA,将克隆到的目的基因连接pGEM T-Eesy载体,构建重组质粒pGEM-T/HMC-Try。对重组质粒进行酶切分析和测序鉴定,并将获得的核苷酸序列与GenBank中的DNA序列进行Blast同源性分析。 结果:经酶切鉴定和测序证实,获得了含有735 bp的HMC-Try cDNA,同源性分析显示与文献报道的序列完全一致。 结论:用RT-PCR法成功地克隆到HMC-Try cDNA,为下一步表达重组类胰蛋白酶及其功能研究打下了基础。
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