【摘 要】
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目的:克隆人肥大细胞类胰蛋白酶(human mast celltryptase,HMC-Try)cDNA。
方法:根据GenBank中HMC-Try基因序列,设计PCR引物,用RT-PCR方法,从人包皮组织中获取HMC-Try cDN
【机 构】
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汕头大学医学院变态反应学与炎症学研究所,汕头515031
【出 处】
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2003年中国博士后生命科学学术研讨会暨院士论坛
论文部分内容阅读
目的:克隆人肥大细胞类胰蛋白酶(human mast celltryptase,HMC-Try)cDNA。
方法:根据GenBank中HMC-Try基因序列,设计PCR引物,用RT-PCR方法,从人包皮组织中获取HMC-Try cDNA,将克隆到的目的基因连接pGEM T-Eesy载体,构建重组质粒pGEM-T/HMC-Try。对重组质粒进行酶切分析和测序鉴定,并将获得的核苷酸序列与GenBank中的DNA序列进行Blast同源性分析。
结果:经酶切鉴定和测序证实,获得了含有735 bp的HMC-Try cDNA,同源性分析显示与文献报道的序列完全一致。
结论:用RT-PCR法成功地克隆到HMC-Try cDNA,为下一步表达重组类胰蛋白酶及其功能研究打下了基础。
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