对虾白斑综合症病毒(WSSV)极早期基因启动子的研究

来源 :第五届青年海洋科学研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:yuanlaiyizhizailiula
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  对虾白斑综合症病毒(WSSV)是困扰对虾养殖业最主要的病原体,目前人们对它的侵染机制还缺乏了解.DNA病毒的基因转录通常具有时相性的特征,根据转录时间的不同可以细分为极早期基因、早期基因、晚期基因。本研究在建立在已经通过基因芯片的方法筛选出的18个极早期基因,通过基因的序列分析以及极早期基因启动子的分析,选出六个较强的极早期基因wssv051,wssv056,wssv083,wssvl08,wssvl78,wssv249,对这些极早期基因的启动子单独克隆至pIZ△IE/EGFP质粒中,并转染至昆虫细胞High Five细胞系中,使得GFP报告基因的转录在wssv极早期基因启动子的调控之下。再通过一系列的启动子的缺失突变,用流式细胞仪定量GFP报告基因的强度来判断这六个启动子的最强最小区域,通过序列分析比较这些最小区域的共通性,同时也为找出与这些极早期基因启动子结合的作用因子做铺垫,进一步揭示病毒与宿主之间的相互作用而了解wssv的侵染机制。此外,由于DNA病毒极早期基因启动子是基因工程中强启动子的良好来源,本研究确定出最强的启动子区域可用于构建基因工程表达载体,特别是适用于虾类的表达载体上有一定的应用前景。
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