几丁质酶以几丁质为底物水解成N-乙酰-D-氨基葡萄糖和水.在植物受病原菌侵染、水杨酸、茉莉酸、以及冷、热、干旱等生物或非生物因素诱导时,几丁质酶基因表达量会迅速提高.杜仲是原产于中国的雌雄异株落叶木本植物,是传统的名贵中药材.杜仲被应用的最早记载是在东汉时期的《神农本草经》.杜仲的药用价值主要是双向调节血压和抑菌两方面.2002年Huang等从杜仲中分离到两种抗菌肽EAFP1和EAFP2(Euconnia Antifungal Protein,EAFP),对八种植物病原真菌有明显抑制作用,结构分析发现,EAFP2蛋白含有几丁质结合结构.2008年本实验室从杜仲皮中分离到杜仲抗菌肤EAFP3，该抗菌肤对白色念珠菌有明显的抑制作用。本研究基于本实验室前期对杜仲抗菌蛋白研究和转录组研究结果，对转录组库中可能的几丁质酶基因片段进行了全基因序列的克隆研究。 采用RACE技术，克隆了多个杜仲几丁质酶基因(EuCH1T)全长序列，将其中的EuCHIT1构建植物表达载体pSH-35S-EuCHIT1;使用农杆菌介导法遗传转化三星烟草(Nicotiana tabacum cv.Xanthin)，对筛选的转基因植株抗病性进行分析的结果表明，转基因植株和野生型植株在接种15天后灰霉病的病斑直径分别为0.77mm和4mm.qRT-PCR研究结果表明，转EuCHIT1基因烟草中水杨酸合成途径关键基因EDS1(Enhanced Disease Susceptiblel,EDS1)与野生型相比表达量差异不显著，而茉莉素受体基因COI1(Coronatine Insensitive,COI1)在转基因植株中受到明著抑制，而病程相关蛋白基因Prla表达量有显著上调作用。说明可以利用EuCHIT1基因创制抗灰霉病转基因烟草新种质。