【摘 要】
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本文探索了血清浓度以及SCF、LIF、GDNF对牛精原干细胞体外存活和增殖的影响,并对其进行了鉴定.试验1:以高糖DMEM为基础培养液,添加浓度为0％、2.5％、5％和10％的胎牛血清(Fetal bov
【机 构】
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西北农林科技大学生物工程研究所,杨凌,712100
【出 处】
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全国兽医外科学第13次学术研讨会、小动物医学第1次学术研讨会暨奶牛疾病第3次学术讨论会
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本文探索了血清浓度以及SCF、LIF、GDNF对牛精原干细胞体外存活和增殖的影响,并对其进行了鉴定.试验1:以高糖DMEM为基础培养液,添加浓度为0％、2.5％、5％和10％的胎牛血清(Fetal bovine serum,FBS),分为四个试验组.结果表明,血清浓度影响牛精原干细胞的体外增殖,添加2.5％的FBS比较合适.试验2:培养液中加入不同浓度的SCF、LIF及GDNF,可增加精原干细胞的数量,其中加入20 μg/LSCF、80 μg/L GDNF、10 μ g/L LIF后,与对照组比较能显著提高精原干细胞数(P＜0.05).采用碱性磷酸酶染色、细胞免疫组织化学染色和RT-PCR对牛精原干细胞进行鉴定,结果碱性磷酸酶染色呈弱阳性;细胞免疫组织化学染色Integrin β 1阳性、c-kit阳性;经RT-PCR扩增,获得了120bp的Gfr α1序列和280bp的c-kit序列,与预期的扩增产物大小一致.因此,培养液中添加2.5％FBS、20 μg/L SCF、80 ng/mLGDNF、10μg/L LIF对精原干细胞的增殖有利.
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