过氧化氢对NIH3T3细胞蛋白磷酸酶2A催化亚基甲基化的调控作用

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目的探讨过氧化氢诱导的氧化应激对小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3蛋白磷酸酶2A催化亚基C亚基(PP2A-C)甲基化修饰的调控作用。方法过氧化氢处理小鼠NIH3T3细胞后,光镜下观察细胞形态,流式细胞仪检测细胞周期,蛋白免疫印迹检测LCMT,PME表达及PP2A-C甲基化水平。细胞核分离试剂分离细胞胞浆蛋白及核蛋白,抗体检测LCMT,PME表达及PP2A-C甲基化水平。结果过氧化氢刺激NIH3T3细胞1 h后,细胞形态未见明显改变,细胞周期阻滞,细胞内总PP2A-C不变,但非甲基化PP2A-C表达增高,PME,LCMT表达不变。细胞核分离试剂分离细胞胞浆蛋白及核蛋白,LCMT主要分布在胞浆而非细胞核,PME在胞浆及细胞核中均有表达。非甲基化PP2A-C增加在胞浆及细胞核均有增加,但细胞核增加为主。结论过氧化氢改变NIH3T3细胞PP2A-C修饰状态。
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