生理浓度丁酸对Caco-2细胞肠屏障作用中JNK通路的效应

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目的观察生理浓度丁酸作用Caco-2细胞肠屏障时,JNK细胞信号通路的作用及与AMPK通路的关系。方法建立Caco-2细胞单层肠屏障模型,分成不加药物的对照组(Con组)、仅添加2mmol/L丁酸钠的生理浓度丁酸钠组(2BA组)、仅加入JNK特异性抑制剂的20μmol/L SP600125组(SP组)、20μmol/L SP600125+生理浓度丁酸钠组(Mix组)。检测各组处理后24h、48h、72h跨上皮细胞电阻(TER)、CCK-8法吸光度及72h菊粉-FITC透过率、流式细胞仪检测细胞凋亡水平、吖啶橙(AO)/碘化丙啶(PI)双染法荧光显微镜检测凋亡率、Western blot法检测JNK、AMPK、ACC等蛋白的表达。结果 2BA组TER明显较Con组升高,P<0.05;Mix组TER较2BA组低,该组CCK-8吸光度、菊粉-FITC、流式细胞仪凋亡水平及AO/PI双染荧光显微镜凋亡结果均比2BA组高,P<0.05。2BA组p-AMPK、p-ACC高于Con组和Mix组,P<0.05。Mix组p-JNK比2BA组低,P<0.01。结论生理浓度丁酸钠可保护肠屏障功能,JNK在该过程中起协同作用,并与AMPK活化程度有关。
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