【摘 要】
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杆状病毒表达载体系统(Baculovirus expression vector system,BEVS)是目前用于研究重组蛋白最有效方法之一。它可以高水平地表达外源基因,表达产物的生物学特性与天然产物相
【机 构】
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河南农业大学牧医工程学院; 国家兽用药品工程技术研究中心;
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杆状病毒表达载体系统(Baculovirus expression vector system,BEVS)是目前用于研究重组蛋白最有效方法之一。它可以高水平地表达外源基因,表达产物的生物学特性与天然产物相似。为了在BEVS中最大程度地表达外源蛋白,必需对其接种参数进行优化,而杆状病毒滴度的测定就成为一项关键的技术。本文综述了8种杆状病毒滴度测定方法,分别为空斑测定法、终点稀释法、定量实时PCR(Q-PCR)测定法、流式细胞术、悬浮培养滴定(Suspension culture titration,SCT)法、免疫染色法、测定活细胞大小法和比色指示剂法。免疫染色法是目前最广泛应用的方法,其具有用时短、准确度高的优点。这些测定方法为重组蛋白的表达提供了有效的依据,使得BEVS在抗体和药物表达方面更加可控。
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