【摘 要】
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目的 探讨槲皮素对异烟肼(INH)诱导的L-02细胞凋亡的抑制作用及其可能的作用机制.方法 将体外培养的人肝细胞L-02分为对照组、INH组、槲皮素低剂量组、槲皮素高剂量组.采用Hoechst33258荧光染色法检测细胞凋亡率;MTT法检测L-02细胞存活率;分光光度法检测细胞上清液中LDH活力;制备L-02细胞线粒体,利用DCFH-DA和Rho-123荧光探针检测活性氧(ROS)水平及线粒体膜电
【机 构】
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佳木斯大学基础医学院,黑龙江佳木斯154007
【出 处】
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中国环境诱变剂学会第七届全国会员代表大会暨第十七次学术大会
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目的 探讨槲皮素对异烟肼(INH)诱导的L-02细胞凋亡的抑制作用及其可能的作用机制.方法 将体外培养的人肝细胞L-02分为对照组、INH组、槲皮素低剂量组、槲皮素高剂量组.采用Hoechst33258荧光染色法检测细胞凋亡率;MTT法检测L-02细胞存活率;分光光度法检测细胞上清液中LDH活力;制备L-02细胞线粒体,利用DCFH-DA和Rho-123荧光探针检测活性氧(ROS)水平及线粒体膜电位(ΔΨm);应用Western blot法检测细胞中凋亡关键蛋白酶Caspase 3的表达.结果 L-02细胞经INH处理后,细胞凋亡率增加、细胞存活率及线粒体功能下降、LDH活力增高、ROS水平增加、线粒体ΔΨm降低、Caspase 3蛋白表达上调(P<0.01);而槲皮素能够不同程度的抑制INH所致的细胞损伤,明显降低细胞凋亡率、增加细胞存活率、减少LDH的漏出、改善线粒体功能、降低ROS水平、下调Caspase 3蛋白表达(P<0.01).结论 槲皮素能够抑制由INH诱导的L-02细胞凋亡,该抑制作用可能与其减少ROS释放,改善线粒体功能,抑制线粒体细胞凋亡途径有关.
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