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目的：比较对吉非替尼敏感和耐药的人肺腺癌细胞株对埃克替尼、厄洛替尼敏感性和耐药性差异的基础上，建立对三种EGFR-TKI敏感和耐药的人肺腺癌细胞株的microRNA表达谱，从中筛选出可能与吉非替尼、埃克替尼、厄洛替尼敏感和耐药密切相关microRNA，并行real-time PCR验证芯片结果，筛选鉴定人肺腺癌EGFR-TKIs获得性耐药相关的microRNA。为深入研究肺腺癌EGFR-TKIs敏感和抗性的分子标志物、指导肺癌的“个体化”治疗提供理论基础和实验依据。方法：本研究以Gefitinib高度敏感的PC9细胞以及由PC9细胞经过MNNG诱变筛选得到的具有不同吉非替尼IC50的三株耐药细胞株PC9/AB2,PC9/AB11,PC9/BB4为研究对象，应用MTT法检测吉非替尼、埃克替尼、厄洛替尼对四株细胞的IC50，得到其治疗指数。鉴定吉非替尼敏感株PC9细胞与三株耐药细胞对吉非替尼、埃克替尼、厄洛替尼的敏感性和耐药性的差异，并以适当药物浓度维持耐药细胞的耐药性。在此基础上进一步应用microRNA表达谱芯片技术，建立与人肺腺癌细胞吉非替尼、埃克替尼、厄洛替尼耐药相关的microRNA表达谱，比较其差异，应用real-time PCR验证芯片结果。结果:TKI耐药细胞株PC9/AB2,PC9/AB11,PC9/BB4与TKI敏感细胞株PC9比较，PC9/AB2细胞形态变化较明显，胞体细长;TKI耐药肺癌细胞株PC9/AB11,PC9/AB2,PC9/BB4对吉非替尼的耐药指数远高于埃克替尼和厄洛替尼;分别用EGFR-TKIs吉非替尼、埃克替尼和厄洛替尼处理后，人肺腺癌吉非替尼耐药细胞株PC9/AB11,PC9/AB2,PC9/BB4间microRNA表达谱比较，存在显著差异;TKI耐药株microRNA表达谱在不同EGFR-TKIs处理组间存在明显差异；microRNA对肺腺癌细胞EGFR-TKIs耐药的调控是一个由多种microRNA共同参与的复杂生物过程。结论:TR工耐药肺腺癌细胞株PC9/AB11,PC9/AB2,PC9/BB4对吉非替尼的IC50远高于敏感株PC9细胞;TRI耐药肺癌腺癌细胞株PC9/AB11,PC9/AB2,PC9/BB4对埃克替尼和厄洛替尼耐药性显著低于吉非替尼;TKI敏感肺腺癌细胞株与耐药细胞株(PC9/AB11,PC9/AB2,PC9/BB4)间，以及三株TKI耐药细胞株间均存在microRNA表达谱差异;在PC9,PC9/AB11,PC9/AB2,PC9/BB4细胞株中，吉非替尼、埃克替尼和厄洛替尼处理组间的microRNA表达谱也存在显著差异;TKI耐药肺腺癌细胞株中miR-a071高表与高IC50和高RI呈正相关，它可能是与肺腺癌EGFR-TKIs耐药相关的microRNA.