免疫组化细胞核阳性指数测试中的放大倍数效应

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方法:免疫组化阳性结果通常需要定量,需要在显微镜下或数字图像上计数单位细胞中的阳性细胞数量,即阳性指数,此时涉及一个基本问题,即:应该在多大的放大倍数下计数阳性结果?是否在不同的放大倍数下计数可得到相同的阳性指数?或者在高倍镜下计数可得到更高的阳性指数?本文对这一问题进行了初步探讨,旨在为免疫组化阳性指数测试时显微镜放大倍数的选择提供一个基本参考原则。方法:材料采用葡萄胎和乳腺癌临床病理切片标本,行免疫组化染色,抗体为3项核标记抗体,包括核增殖指数抗体Ki67、雌激素抗体ER和孕激素抗体PR,复染后分别计数上述不同抗体单位细胞中阳性细胞核的数量。同一切片采用低倍镜(物镜10倍)、中倍镜(物镜20倍)和高倍镜(物镜40倍)分别测试Ki67、ER和PR的阳性指数。结果:(1)ER、PR和Ki67核阳性指数在10倍镜下均较20和40倍镜为高,20倍镜下的阳性指数较40倍镜为高。(2)随着放大倍数的增加,所计数的ER、PR和Ki67的阳性细胞数及阴性细胞数皆增加,阳性指数降低。结论:(1)不同放大倍数下测得的Ki67阳性指数不同,放大倍数越高,Ki67阳性指数越低,结果越真实;(2)放大倍数对细胞核标记抗体阳性指数的影响源自低倍镜下背景结果观察不清、易被忽视所致;(3)在考虑减少随机抽样误差的情况下应该在高的放大倍数下计数核的阳性指数。病理工作者在诊断及研究中应根据具体目的确定免疫组化细胞核阳性指数测试时的显微镜放大倍数。
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