【摘 要】
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以青花菜显性核不育材料Ms-cdl与东升芥兰回交3代分离群体为材料,通过BSA方法,分别构建可育与不育DNA池各2个.利用远红外荧光标记AFLP技术及LICOR基因测序仪对可育与不育池之间进行AFLP连锁标记快速筛选,从192对引物组合中筛选出12个与显性核不育基因相连锁的AFLP标记,其遗传距离最小为1.0cM,最大为20cM.本研究建立了一套适于分子标记辅助选择,从表型性状入手快速鉴定连锁标记
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以青花菜显性核不育材料Ms-cdl与东升芥兰回交3代分离群体为材料,通过BSA方法,分别构建可育与不育DNA池各2个.利用远红外荧光标记AFLP技术及LICOR基因测序仪对可育与不育池之间进行AFLP连锁标记快速筛选,从192对引物组合中筛选出12个与显性核不育基因相连锁的AFLP标记,其遗传距离最小为1.0cM,最大为20cM.本研究建立了一套适于分子标记辅助选择,从表型性状入手快速鉴定连锁标记的高通量远红外荧光AFLP分析方法.
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本研究以榨菜无菌苗子叶、茎段为外植体,研究通过不同的再生方法建立的再生体系.结果表明:带叶柄的叶培养在MS+0.5mg/LNAA+3mg/LBA上可直接诱导不定芽的产生,诱导率达100﹪.子叶培养在MS+0.25mg/LNAA+0.5mg/LBA+0.25mg/L2,4-D培养基上,可获得具有高分化能力的愈伤组织,愈伤组织在MS+1mg/LBA+0.2mg/LNAA培养基上的分化频率可达50﹪左右
以萝卜幼小花药与叶片为材料,初步建立了mRNA差异显示技术体系.4种提取总RNA方法中,改进的SDS/酸酚法比CTAB/酸酚法和SDS碱酚法更合适;改进的热硼酸法(HB)提取的RNA质量也较高,但所需时间较长,成本较高.以改进的SDS/酸酚法获得的RNA进行纯化后,其OD/OD在2.0~2.2之间,说明RNA样品蛋白或杂质较小;总RNA进行反转录与差异显示分析表明,高分辨力的cDNA片段在100~
以榨菜细胞质雄性不育系及其保持系基因组总DNA为模板,通过特异引物PCR方法克隆了榨菜atp A基因,基因大小为1524bp,推定编码507个氨基酸,进化分析表明atpA基因非常保守;进一步分析发现了不育系及其保持系atpA基因的5′UTR区存在差异,这为能量代谢相关基因与细胞质雄性不育性产生的关系提供了分子证据.
番茄是世界上最主要的蔬菜作物之一,叶霉病(Cladosporium fulvum Cooke)的发生和蔓延使保护地番茄生产受到严重影响,培育抗叶霉病的番茄品种是控制该病害最经济有效的方法.本研究根据Cf-5的基因序列设计特异扩增引物,以7个含有不同叶霉病抗病基因的品种为试材,扩增Cf-5基因2558~3523bp之间的单拷贝片段,7个材料均获得了966bp的特异扩增片段.用限制性内切酶Tag I对
本试验构建了以CaMV35s启动子驱动的含有番茄酸式胞外几丁质酶基因(CHI3)的植物表达栽体,通过冻融法导入根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)菌株EHA105中,用叶盘法转化西瓜(Citrullus lanatus (Thunb.)Mansfeld var.citroides)栽培种"中育1号",通过卡那素抗性鉴定、CHI3基因的PCR检测、Southern斑点杂交
本文利用同一PCR反应体系,对分别与番茄抗根结线虫的Mi基因和抗番茄花叶病毒病的Tm基因紧密连锁的SCAR标记进行了同时扩增筛选,扩增的特异性片段与单引物扩增片段基本完全吻合,其中与Mi基因紧密连琐的SCAR1标记为共显性标记,抗感试材均产生750bp的特异片段,纯合和杂合抗病基因型存在TaqI酶切位点,酶切后分别产生了570bp、200bp和750bp、570bp、200bp的不同特异性片段,而
利用随机测序法,从结球甘蓝的cDNA文库中,分离到一个转录调控肿瘤蛋白基因类似物,命名为BoTCTP,该基因长828bp,包含一个504bp的完整开放编码框,编码168个氨基酸,在3端含有一个poly(A)尾巴.序列同源性比较发现,该基因与高等植物的TCTP基因有70﹪以上的同源性,其中与拟南芥的的TCTP基因的同源性最高,达到90.5﹪,而与动物,酵母的TCTP基因同源性较低.以BoTCTP为探
对基因分离方法、已经分离的基因和基因工程在蔬菜作物育种上的应用进行了综述,并讨论了基因工程育种存在的问题和应用背景.
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从本院分离的病毒株系PMMV-QD提取RNA.自行设计、合成引物P1、P2,用RT-PCR扩增PMMV-QD CP的cDNA,插入T-载体克隆该片段,转化感受态受体菌XL1-Blue,用蓝白菌落筛选转化株,用PCR检测白色菌落,确认获得了带有cDNA的阳性重组子.测序和序列比对结果表明该片段确实含有PMMV的CP编码区,并且cDNA与已经报道的病毒株系核苷酸顺序的同源性达到97.7﹪.