【摘 要】
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目的:研究miR-218对小鼠胚胎干细胞(mESCs)定向心肌细胞分化的调控作用及miR-218潜在的参与调控心肌分化的靶基因.方法:"悬滴-悬浮-占壁"三步法作为mESCs定向心肌分化模型,分别转染miR-218 mimic和miR-218 inhibitor入mESCs,运用Western Blot、流式细胞术、免疫荧光法、划痕法等方法检测相关指标,通过生物信息学分析mESCs中miR-218
【机 构】
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浙江大学药学院药理毒理研究所,浙江省杭州市,310058
【出 处】
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2016第十一届心血管药理专业委员会全国心脑血管药理学术会议
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目的:研究miR-218对小鼠胚胎干细胞(mESCs)定向心肌细胞分化的调控作用及miR-218潜在的参与调控心肌分化的靶基因.方法:"悬滴-悬浮-占壁"三步法作为mESCs定向心肌分化模型,分别转染miR-218 mimic和miR-218 inhibitor入mESCs,运用Western Blot、流式细胞术、免疫荧光法、划痕法等方法检测相关指标,通过生物信息学分析mESCs中miR-218可能的靶基因序列,并利用PCR、qRT-PCR和双荧光素酶法进一步验证.结果:miR-218 mimic转染mESCs后,中胚层形成受影响,心肌分化受抑制,mESCs分化的心肌细胞数量也减少.
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