【摘 要】
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以小鼠脑组织cDNA文库为模板用PCR扩增C1qA、C3a和C3b等补体组分的cDNA序列,克隆到细菌双杂交载体pBT中获得重组诱饵质粒pBT-C1qA、pBT-C3a和pBT-C3b,分别与本实验室已经构建的猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype 2,SS2)的全基因组细菌双杂交文库中的膜蛋白、分泌蛋白、蛋白酶和肽酶等pTRG重组质粒共转化大肠杆菌XL1-Blue
【机 构】
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华中农业大学动物医学院农业微生物学国家重点实验室,湖北武汉430070
【出 处】
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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第十次学术研讨会
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以小鼠脑组织cDNA文库为模板用PCR扩增C1qA、C3a和C3b等补体组分的cDNA序列,克隆到细菌双杂交载体pBT中获得重组诱饵质粒pBT-C1qA、pBT-C3a和pBT-C3b,分别与本实验室已经构建的猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype 2,SS2)的全基因组细菌双杂交文库中的膜蛋白、分泌蛋白、蛋白酶和肽酶等pTRG重组质粒共转化大肠杆菌XL1-Blue MRF Kan菌株,进行细菌双杂交实验,系统筛选和鉴定SS2的补体结合蛋白.目前,已经筛选到候选C1qA、C3a和C3b的补体结合蛋白2个、4个和1个,正在进行相互作用验证和互作结构域的鉴定.C4、C6、C3aR、C5aR、FH等补体的结合蛋白也在筛选之中.这些补体结合蛋白的鉴定对深入研究SS2的补体逃逸机制奠定了的基础.
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