【摘 要】
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鉴定复杂生物基质中的硫酸软骨素(chondroitin sulfate)较为困难,不仅操作过程繁琐,耗时长,且对样品的纯度要求高.本研究建立了一种酸降解结合1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(
【机 构】
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大连工业大学食品学院 辽宁大连116034
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鉴定复杂生物基质中的硫酸软骨素(chondroitin sulfate)较为困难,不仅操作过程繁琐,耗时长,且对样品的纯度要求高.本研究建立了一种酸降解结合1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮(1-phenyl-3-methyl-5-pyrazolone,PMP)衍生化的液相色谱串联质谱技术(high-pedormance liquid chromatography-mass spectrometry,HPLC-MSn)分析硫酸软骨素的方法.首先,对猪骨和鲨鱼硫酸软骨素标准品进行酸水解,降解产物经PMP衍生化后,利用HPLC-MSn进行检测.经过多级质谱分析,鉴定出了包括二糖、三糖和四糖在内的10种寡糖,其中一些寡糖还带有硫酸基或乙酰基.同时,我们考察了三氟乙酸浓度(0.1~2.0M)对这些寡糖产率的影响,结果表明三氟乙酸的最优浓度为0.2mol/L.然后,将该分析方法应用于经过简单提取的鲟鱼脊骨和猪喉管中硫酸软骨素的检测,以这10种寡糖为依据,实现了这两种生物样品中硫酸软骨素的快速鉴定,证明该方法能在短时间内有效分析基质复杂的生物样品中的硫酸软骨素.
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