目的高温、电离辐射、环境污染物、低氧等环境刺激均可导致细胞应激,并直接影响机体在极端环境中的存活和正常功能,阐明应激/适应信号途径必须分析蛋白质的网络运作和相互作用。蛋白质质量控制,对维持应激下细胞的正常功能至关重要,热休克蛋白90(Hsp90)在蛋白质质量控制中发挥重要作用,与细胞应激/适应密切相关,其底物蛋白多为重要的结构蛋白和信号转导分子,与其相互作用的200余种底物蛋白参与DNA断裂损伤修复识别、细胞周期调控、应激下转录调控、线粒体稳态及自噬、凋亡等多通路的复杂网络调控。因此,可将HSP90作为研究应激下不同信号通路交叉调控作用和筛选关键的未知信号蛋白分子的有力工具。方法运用Hsp90抑制剂、Hsp90SiRNA干扰、ATPase突变株转染、CRISPER-cas9敲除Hsp90α的手段抑制Hsp90功能,运用比较蛋白质组学方法观察对应激损伤关键分子及相关通路的影响。结果Hsp90抑制剂导致细胞对热应激敏感;Hsp90αCRISPER-cas9敲除株伴随与DNA双链断裂损伤识别的关键复合物MRE11-RAD50-NBS1水平下降,氧化应激诱导DNA双链断裂损伤加重:氧化应激导致的细胞G2/M期阻滞伴随Cdk1、Cyclin B1水平改变及20S蛋白酶体活性降低有关,氧化应激中HSP90对26S蛋白酶体泛素化降解途径有调控作用;Hsp90抑制可导致线粒体自噬加重,线粒体形态异常。结论从HSP90相互作用蛋白谱中找寻有意义的应激网络调控通路、通路间的交叉调控作用,将有助于能阐明应激反应的分子机制,为探讨相关疾疾病的机理、治疗、预防和新药开发提供重要的理论基础。