【摘 要】
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目的 探究心律失常大鼠心肌组织中脑钠钛(brain natriuretic peptide,BNP)蛋白、mRNA水平的表达规律及法医学意义.方法 雄性SD大鼠36只,随机分为空白对照组、心律失常15m
【机 构】
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中国医科大学法医学院,辽宁沈阳110001
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目的 探究心律失常大鼠心肌组织中脑钠钛(brain natriuretic peptide,BNP)蛋白、mRNA水平的表达规律及法医学意义.方法 雄性SD大鼠36只,随机分为空白对照组、心律失常15min、30min、1h、3h、6h组.实验组参照Salimbeni、Grimaldi建立大鼠心律失常的方法,采用颈静脉推注CaCl2溶液建立大鼠心律失常模型,观察到分组时间,进行过量麻醉处死.取大鼠心脏中间部分制作石蜡切片,采用免疫组织化学方法染色后镜下观察BNP的表达；取心肌组织研磨成粉末,采用western印迹法检测BNP的表达量；采用real-time PCR荧光实时定量PCR方法检测心肌组织中mRNA水平.结果 免疫组化染色结果显示,在各实验组动物心肌组织中,均有BNP的阳性表达,而在对照组中未见表达.在实验组中,BNP表达以心内膜为多,且表达随时间变化有一定规律性.Western印迹检测结果显示,对照组中条带颜色较浅,而在实验组中颜色较深,并随时间增加而表达增多.Real-time PCR结果显示,与对照组比较各实验组动物心肌组织中mRNA水平均有升高,并呈现先下降后升高的趋势.以上结果证实,心律失常大鼠心肌组织在心律失常15min时BNP蛋白及BNPmRNA即有表达,而后呈现先下降后升高的趋势.结论 通过检测死者心肌组织中BNP及BNPmRNA的表达间接证明致死性心律失常的存在,这对全面阐明心源性猝死的死亡机制具有重要意义,可为无明显形态学改变的心源性猝死案例提供确切的依据.
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