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目的:探讨血卟啉经超声激活后能否生成单线态氧、降低骨桥蛋白(OPN)表达,从而抑制肝癌细胞株HepG2的抗失巢凋亡能力。
方法:将HepG2细胞悬液随机分为5组:血卟啉组,培养液中加入血卟啉40 ul孵育30 s;超声辐照组,以1.0MHz、1.5W/cm2超声辐照30 s;血卟啉与超声辐照组,同样方法予以血卟啉与超声联合处理;血卟啉、组氨酸与超声辐照组,加入活性氧捕获剂-组氨酸后进行血卟啉与超声联合处理;及空白对照组。各组处理后细胞悬液一部分利用1,3一二苯基异苯并呋喃(1,3-DPBF)估计单线态氧生成量,一部分在软琼脂中培养2 w后观察其集落形成能力,还有一部分经悬浮培养后以AnnexinV—FITC/PI双染法检测失巢凋亡率、RT-PCR检测骨桥蛋白的mRNA表达、Western blot检测OPN的蛋白表达。
结果:血卟啉与超声辐照组DPBF的相对消耗量即单线态氧生成量明显高于其它各组,且该组HepG2细胞在软琼脂中无细胞集落形成,与其它组相比失巢凋亡率增高(18.46±4.08%)、OPN的表达降低。
结论:血卟啉经超声激活后产生的单线态氧可降低OPN表达,从而发挥其抑制HepG2细胞抗失巢凋亡的作用。