【摘 要】
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近年来,国内外在结核病诊断方面取得了诸多进展,不少诊断新方法、新技术在临床上开展应用.其中Xpert MTB/RIF试验整合了传统的PCR检测所需的三个步骤,对结核病的早期诊断及耐
【出 处】
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中华医学会结核病学分会2014年学术大会
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近年来,国内外在结核病诊断方面取得了诸多进展,不少诊断新方法、新技术在临床上开展应用.其中Xpert MTB/RIF试验整合了传统的PCR检测所需的三个步骤,对结核病的早期诊断及耐药菌株尤其是耐利福平菌株(RIF)具有较高的敏感性和特异性,Xpert MTB/RIF核酸检测方法采用Genexpert检测系统，是一种半巢式实时荧光定量PCR体外诊断技术，以rpoB基因为靶基因，自动提取DNA后扩增rpoB基因的192bp片段进行检测，同时采用3种特异性的引物和6种分子信标同时检测6种探针，其中5个相互重叠的分子探针(分别以探针A-E命名)选择性覆盖rpoB基因的81bp核心区，用于检测利福平耐药。XpertMTB/RIF试验在痰标本中的检测极限为131CFU(菌落形成单位)/mL，灵敏度远高于涂片检测。普通PCR技术容易发生交叉污染，假阳性率高，故对TB诊断价值不高，而Xpert MTB/RIF试验采用一次性塑料反应盒，标本与反应盒一一对应，然后放入检测仪的密闭反应孔中进行反应，因此每个标本的PCR反应均相互独立，避免交叉感染增加了试验的安全性。且操作较为简单，仅需标本与含氢氧化钠及异丙醇的处理液常规按1:2比例混合，若痰中含脓球则为1:3,震荡，室温静置15min，将混合液转移至一次性多室塑料反应盒中，置于CeneXpert仪器进行全自动检测，约2h即可读取结果.
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