H5N1亚型禽流感病毒NA基因在重组禽痘病毒中的表达

来源 :中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会暨第六届代表大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lonlychanging
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本文从含有禽流感病毒A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)NA基因的质粒PMD18-TNA中切下NA基因片段,将其亚克隆到pSY538中的痘病毒早晚期启动子LP2EP2的下游,又将LacZ基因克隆到该质粒中,然后将同时含有NA及LacZ基因的片段再亚克隆到禽痘病毒载体pSY681中,从而构建出表达AIVNA蛋白基因的重组禽痘病毒转移载体.用脂质体介导的方法将转移载体转染已感染禽瘟病毒S-FPV-017的鸡胚成纤维细胞,在X-gal存在的条件下,经过蓝白斑筛选、数轮蚀斑纯化、PCR和Western-blot检测等,结果获得了能稳定表达该蛋白的重组禽痘病毒,为进一步探讨NA蛋白的免疫原性奠定了基础.
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