重组人α-防御素-3基因乳腺定位表达及抗菌效果检测

来源 :2013年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理学专业委员会学术研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sina
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目的:探讨减毒沙门氏菌介导的人HNP-3乳腺定位表达产物对革兰氏阴性菌的抗菌效果.方法:将构建的乳腺定位表达载体pEGFP-WAP-HNP-3经电转化导入减毒沙门氏菌ΔcrpC78-1,构建重组菌ΔcrpC78-1(pEGFP-WAP-HNP-3),将重组菌分点注射到怀孕后20~22d 母兔腹部乳腺分布区,收集兔分娩后不同时间的泌乳,Western blot检测乳中HNP-3表达情况,ELISA 检测乳中HNP-3表达水平,活菌计数法检测泌乳中HNP-3的抑菌效果.结果:乳汁中在40 kDa处有HNP-3阳性杂交信号,母兔分娩后第5d HNP-3表达量最高,可达289 ng/ml,及至第25 d表达量仍可达到136ng/ml.血清和阴性对照乳中未检测到HNP-3.活菌计数法结果表明含HNP-3的兔奶对大肠杆菌、沙门氏菌和绿脓杆菌有较好的抑菌效果,抑菌率分别为92.8%、42.0%和21.3%;结论:减毒沙门氏菌介导的人HNP-3乳腺定位表达产物对革兰氏阴性菌具有抑菌效果,为动物乳房炎的预防及新一代抗菌药物的研发提供了新思路.
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