【摘 要】
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目的 研究建立我国流行株C型HBV转基因小鼠,为我国乙肝防治研究提供实验动物模型。方法 采用受精卵显微注射法,制备HBV转基因小鼠,用PCR、ELISA检测、荧光定量PCR检测法和免
【机 构】
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南方医科大学实验动物中心,广州510515南方医科大学实验动物中心,广州510515;解放军第458医院传染病中心,广州510602解放军第458医院传染病中心,广州510602
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目的 研究建立我国流行株C型HBV转基因小鼠,为我国乙肝防治研究提供实验动物模型。方法 采用受精卵显微注射法,制备HBV转基因小鼠,用PCR、ELISA检测、荧光定量PCR检测法和免疫组化的方法研究HBV基因在转基因小鼠体内的整合、复制和表达情况。 结果 研究共注射受精卵2840枚,筛选注射后成活的受精卵共2256枚,注射成活率为79.4%。注射后受精卵共移植假孕雌鼠85只,其中有42只怀孕,假孕雌鼠妊娠率为49%,共产下F0代小鼠168只,PCR检测共有14只阳性,其中血清HBsAg ELISA检测阳性有5只,HBeAg检测均阴性。血清HBV DNA荧光定量PCR显示,其中2只小鼠的拷贝数大于10<2>copy/ml。经传代产下F1代小鼠61只,PCR检测阳性5只,HBsAg ELISA检测阳性4只,其中肝脏HBsAg免疫组化阳性有2只,而HBcAg均为阴性。且肝组织表达HBsAg为胞浆型,HBcAg为核型。 结论 结果表明,本实验所构建的我国流行株C型HBV基因不但可以于转基因小鼠体内进行复制表达,而且可以在遗传给下一代小鼠。
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