黏菌素诱导PC12细胞自噬及对细胞凋亡的影响

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【目的】探讨黏菌素诱导PC12细胞自噬及对其诱导的细胞凋亡的影响。【方法】不同剂量的黏菌素(31.25-250μg·mL-1)分别与PC12细胞接触不同时间或黏菌素(125μg/mL)与3-MA(3-甲基腺嘌呤)、Rapamycin(雷帕霉素)分别联合作用,运用MDC染色、LC3免疫荧光染色、透射电镜和western blotting方法观察细胞自噬;运用流式细胞术、Hoechst 33258染色和western blotting方法观察细胞凋亡。【结果】黏菌素接触细胞12h时自噬泡最多,LC3-Ⅱ蛋白在此时表达量最高,说明黏菌素可以诱导PC12细胞发生细胞自噬;黏菌素在接触细胞24 h时诱导凋亡,且caspase-3在此时表达量最多。用3-MA预处理细胞后可增加黏菌素的神经毒性,而用Rapamycin预处理后可显著性增加LC3-Ⅱand Beclin 1的水平并降低细胞凋亡率。【结论】黏菌素可诱导PC12细胞发生细胞自噬和凋亡,且细胞自噬可降低黏菌素的神经毒性而起到保护细胞的作用。
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