@@核苷（酸）类似物是目前临床进行抗乙型肝炎病毒（HBV）治疗的主要药物，但长期使用可引起病毒变异产生耐药。目前对HBV的耐药检测主要通过基因测序和线性反向探针杂交等方法，分析HBV基因组中已知与耐药相关的病毒变异。我们建立了高效的HBV基因测序方法，灵敏度达到了常规HBV定量PCR的检测下限(IOOIU/mL)，显著提高了HBV耐药检测的应用价值。我们通过大样本检测分析检出了多种新的耐药变异和多药耐药变异HBV株，并揭示了其演变和抑制的规律，发现耐药病毒株可以传播引起急性肝炎，HBV基因型/亚型与耐药变异类型相关等。表型耐药分析是确定未知与复杂HBV耐药变异的必要方法，其基本策略是构建HBV变异株与野生株基因组重组载体，转染细胞系后定量检测HBV复制中间体，比较在不同药物浓度下病毒复制力的受抑制程度。最近发现某些“新的”变异可以增强耐药变异病毒株的复制力。当前应加强对HBV耐药患者进行动态跟踪，建立和完善医院间协作共享的HBV耐药监测机制和耐药HBV数据库，以更有效地管理HBV耐药。