【摘 要】
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大肠杆菌是寄居在宿主肠道对宿主无害或者造成局部/全身感染的菌群之一.大肠杆菌可以分成三类：非致病性大肠杆菌、肠道致病性大肠杆菌和肠道外致病性大肠杆菌.肠道外致病
【机 构】
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扬州大学兽医学院,农业部禽用生物制剂创制重点实验室,扬州225009
【出 处】
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中国畜牧兽医学会禽病学分会第三届全国禽病分子生物技术青年学术论坛
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大肠杆菌是寄居在宿主肠道对宿主无害或者造成局部/全身感染的菌群之一.大肠杆菌可以分成三类：非致病性大肠杆菌、肠道致病性大肠杆菌和肠道外致病性大肠杆菌.肠道外致病性大肠杆菌(ExPEC)定植在肠道外,并可致全身感染.禽致病性大肠杆菌(APEC)属于ExPEC的成员,APEC引起禽的大肠杆菌病.蛋白合成过程中的质量控制非常重要,在保证基因表达的速度和保真度方面,转录-信使RNA(tmRNA)是一个小的稳定的RNA分子,通常也被称作SsrA或10SaRNA.转录-信使RNA-小蛋白B介导的反式翻译是细菌的翻译质量控制系统.该系统可以直接修饰和降解一些蛋白质,这些蛋白质的生物合成停顿或被阻断,从而该系统可以拯救核糖体,这些核糖体滞留在3端缺失终止密码子的mRNAs序列上.本研究,利用λ-Red系统,成功构建了APEC E058的smpB和ssrA基因缺失株、回复株.在SPF鸡感染模型中,破坏smpB或ssrA和同时破坏这两个基因,都可以显著降低APEC E058的致病性,并且回复株的毒力表型能够得到回复(P＜0.02).生长曲线分析表明,分别在37℃和42℃的条件下,野生株、突变株、回复株在LB培养基中的生长无显著差异.而且,通过定植和持续性感染试验表明,突变株毒力显著减弱.实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析结果表明,突变株和野生株相比,转录调控基因rfaH,某些毒力相关基因kpsM、chuA 和iss的表达水平均显著降低.鸡巨噬细胞HD-11感染试验结果显示,突变株在HD11内繁殖和/或存活的能力降低.然而,在巨噬细胞HD-11吞噬试验和鸡血清抵抗能力方面没有表现出显著差异.这些数据表明,tmRNA-SmpB系统对APECO2E058株的致病机制是至关重要.
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