目的在体外建立一种兔骨髓间充质干细胞分离、纯化、培养扩增的。方法为后续研究提供细胞基础。方法提取新生兔骨髓细胞,采用体外全骨髓细胞贴壁分离培养法进行分离、培养、纯化骨髓间充质干细胞,对其生长进行形态学观察和多向分化能力鉴定。成脂诱导,油红O染色鉴定;成骨诱导,碱性磷酸酶染色、茜素红染色鉴定。结果原代兔骨髓间充质干细胞以集落方式增殖,外形如长梭形,细胞集落呈放射状排列;传代细胞均匀分布,形态均一,细胞生长活跃、扩增迅速、传代周期短。第5代兔骨髓间充质干细胞生长曲线近似"S"型,第2天起生长加速开始进入对数生长期,第4天细胞增殖速度达到峰值。兔骨髓间充质干细胞经成脂诱导培养14天后,油红O染色显示阳性,倒置相差显微镜下可见到细胞内有大量圆形或椭圆形染红脂滴。经成骨诱导培养21天后,显微镜下可观察到细胞呈团块聚集,不透光致密影;碱性磷酸酶染色可见细胞胞浆内出现蓝色颗粒;茜素红染色显示细胞间质中橘红色矿化结节形成。结论应用全骨髓细胞贴壁法可有效分离、纯化、扩增骨髓间充质干细胞,其操作简单,所获得的骨髓间充质干细胞纯度较高,活力强,生物学性状稳定,具有间充质干细胞的自我更新、增殖和多向分化潜能的生物学特性,是比较理想的骨髓间充质干细胞培养法。